中国药典版化学药品修订.ppt

乌司他丁 还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶，分子量 乌司他丁溶液 还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶，分子量 肝素钠乳膏 鉴别（琼脂糖电泳） 2010版药典二部采用电泳法的品种 色谱法的应用：电泳及毛细管电泳法 2010版药典二部采用CE的品种 盐酸头孢吡肟 有关物质 注射用盐酸头孢吡肟 有关物质 抑肽酶 有关物质 注射用抑肽酶 有关物质 例：毛细管电泳（抑肽酶） SDS凝胶电泳图 例：毛细管电泳（抑肽酶） 编号 抑肽酶分子量（KD） 抑肽酶纯度（%） 1 7.3 97.95 2 7.4 97.45 3 7.5 97.50 4 7.3 96.65 5 6.3 99.35 6 6.3 97.90 7 6.3 97.10 生物分析（芯片）仪对抑肽酶分子量和纯度的测定结果 兰州大得利生物化学制药（厂）有限公司提供的抑肽酶的分子量和其它两个厂家的分子量有明显差异。 抑肽酶的纯度测定结果7批供试品都接近100%，可能是抑肽酶和有关物质的分子量相差不大，生物分析（芯片）仪采用的是SDS电泳分离的原理，不能将其分离，不能作为分析抑肽酶纯度的方法。 例：毛细管电泳（抑肽酶） sigma抑肽酶对照品毛细管电泳谱图 1：保留时间为18.417分钟的是去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶， 2：保留时间为18.617分钟的是去丙氨酸-抑肽酶， 3：保留时间为18.829分钟的是抑肽酶峰 例：毛细管电泳（抑肽酶） 供试品毛细管电泳谱图（杭州澳亚生物技术有限公司生产，批号：071015） 例：毛细管电泳（抑肽酶） 编号 上海所结果 去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶（%） 去丙氨酸-抑肽酶（%） 面积归一化法计算抑肽酶主峰含量（%） 1 6.9 6.2 63.6 2 6.9 6.7 83.0 3 7.0 6.2 84.3 4 7.7 6.0 81.4 5 5.8 4.3 15.2 6 4.3 4.8 14.8 7 5.2 4.3 14.3 Sigma对照品 6.2 6.9 81.5 标准规定 ?8.0% ?7.5% / 色谱法的应用：毛细管电泳 分离模式 毛细管区带电泳CZE 胶束电动毛细管色谱MEKC 毛细管等电聚焦CIEF 毛细管凝胶电泳CGE 毛细管电色谱CEC 高分子化合物的分析 手性化合物的分析 色谱法的应用：液相色谱常用检测器 光学检测器：紫外、荧光、示差折光、蒸发光散射（通用型检测器） 电化学检测器：极谱、库仑、安培 电学检测器：电导、介电常数 质谱检测器 选择性检测器：灵敏度较高 检测器类型 品种个数 紫外检测器 1333个 蒸发光散射检测器 28个 示差检测器 10个 电导检测器 5个 2010版药典二部采用检测器情况 色谱法的应用：液相色谱常用检测器 色谱法的应用：蒸发光散射检测器 优点： 适用于没有特征紫外吸收或紫外吸收很弱的待测物，使用UV时灵敏度更低；无需衍生化而直接测定，避免了衍生带来的误差。 可以应用有强紫外吸收的试剂，如氯仿、丙酮等。 适用于组分复杂样品的分析，可以进行梯度洗脱，基线平稳。 通用型检测器，只要待测物挥发性低于溶剂，即可适用。对不同物质，ELSD相应因子的变化比其它检测器要小得多。 对环境影响不灵敏，室温下即可操作。 没有溶剂前缘峰，适用于保留时间短的物质的检测。 与LC-MS的色谱条件一致，可直接进行方法转换。 色谱法的应用：蒸发光散射检测器 影响ELSD响应的因素 载气流速、雾化器设计与温度、流动相的组成和流速等影响雾化过程。 被分析物的浓度和体积质量决定了进入光散射池的气溶胶中的颗粒的直径。 被分析物的折射指数、光源发出的光的强度和波长、光电倍增管的位置等影响散射光强度。 光电倍增管的灵敏度和入射光的强度决定了检测的效率，反映为实验者所观测的峰面积。 色谱法的应用：蒸发光散射检测器 妥布霉素 硫酸庆大霉素 妥布霉素滴眼液 硫酸庆大霉素注射液 硫酸妥布霉素注射液 硫酸奈替米星 硫酸小诺霉素 硫酸奈替米星注射液 硫酸小诺霉素口服溶液 硫酸依替米星 硫酸小诺霉素片 硫酸依替米星注射液 硫酸小诺霉素注射液 注射用硫酸依替米星 硫酸巴龙霉素 硫酸核糖霉素 硫酸卡那霉素 注射用硫酸核糖霉素 硫酸卡那霉素注射液 硫酸链霉素 硫酸卡那霉素滴眼液 注射用硫酸链霉素 注射用硫酸卡那霉素 大豆磷脂 硫酸西索米星 胆固醇 硫酸西索米星注射液 蛋黄卵磷脂 色谱法的应用：蒸发光散射检测器 图 硫酸核糖霉素有关物质色谱图 （蒸发管温度：65℃，分流模式） 总杂质：5.26% 色谱法的应用：蒸发光散射检测器 图 硫酸核糖霉素有关物质色谱图 （蒸发管温度：110℃，不分流模式） 总杂质：4.18% 例2：含量测定（核黄素磷酸钠） 样品编号 注射液有关物质 注射液含量测定 核黄素二磷酸酯 (%) 核黄素 (%) 其他最大杂质（%） 其他杂质总和（