生理周期性牵张应力促进人类膀胱平滑肌细胞增殖分子机制的.PDFVIP

第9 卷第5 期 Vol.9 No.5 2016 年 3 月 March 2016 生理周期性牵张应力促进人类膀胱平滑 肌细胞增殖分子机制的研究 1 1 1 1, 2 1 1* 田 野 ，岳 轩 ，杨童欣 ，陈 林 ，罗德毅 ，王坤杰 （1. 四川大学华西医院泌尿外科，成都 610041 ； 2. 成都大学附属医院泌尿外科，成都 610081 ） 摘要：目的：探索不同模式的牵张应力条件促进人类膀胱平滑肌细胞（human bladder smooth muscle cells ， HBSMCs ）增殖能力的生物学效应，以及这一过程背后的分子生物学机制。方法：将HBSMCs 接种到硅胶膜 上，对其施加单轴拉伸应力，其应变参数分别为2.5% ，5%，10%和 15%，牵张频率参数分别为0.05 ，0.10 ， 0.20 ，0.50 ，1.00 Hz，并设置无应力施加的对照组进行研究。采用溴-脱氧尿嘧啶（bromodeoxyuridine ，BrdU ） 掺入法量化分析细胞的增殖能力，摸索最适合 HBSMCs 增殖的牵张模式。采用实时 PCR （real-time PCR ， RT-PCR ）技术和Western blotting 技术分别从分子水平和蛋白质水平检测生理周期性牵张应力条件下HBSMCs 的PI3K 、SGK1、Akt 、Kv1.3 分子表达情况，以进一步研究应力促进细胞增殖的分子机制。结果：最适合HBSMCs 增殖的牵张应力参数为应变 5% 、牵张频率0.10 Hz ，因该试验组的细胞增殖参数较其他各试验组和对照组更 高，其结果具有统计学意义（P ＜0.05 ）。与对照组相比，牵张试验组的PI3K 、SGK1、Kv1.3 表达量显著升高 （P ＜0.05 ），而Akt 则无明显改变（P ＞0.05 ）。分别应用SGK1 和Kv1.3 的阻滞剂重复细胞牵张试验均可消除 上调的增殖能力。结论：周期性牵张应力可以促进 HBSMCs 增殖，其力学分子生物学信号可能通过 PI3K-SGK1-Kv1.3 通路转导，而PI3K-Akt 通路并未参与其中。 关键词：泌尿外科学；组织工程；平滑肌细胞；细胞增殖；机械应力；信号转导 中图分类号：Q811.6 文献标识码：A 文章编号：1674-2850(2016)05-0428-07 Physiological cyclic stretch induced proliferation of human bladder smooth muscle cells via PI3K-SGK1-Kv1.3 pathway 1 1 1 1, 2 1 1 TIAN Ye , YUE Xuan , YANG Tongxin , CHEN Lin , LUO Deyi , WANG Kunjie (1. Department of Urology, West China Hospital, Sichuan University, Chengdu 610041, China; 2. Department of Urology, Affili