选择性产生雄性或雌性不育植物的方法(专利).docx

选择性产生雄性或雌性不育植物的方法CN 1639344 A 摘要 本发明公开了一种生产雄性或雌性不育植物的方法，该方法包括步骤：用多核苷酸转化植物材料，该多核苷酸编码至少一种与非毒害植物的物质反应产生毒害植物物质的酶，再生这种转化的材料为植物，其中不超过雄性或雌性配子形成和/或成熟的时期，向所述植物施用所述非毒害植物的物质，由此，非毒害植物的物质提供了毒害植物的物质的产生，该毒害植物的物质选择性阻止了所述配子的形成或使其没有功能，其中酶优先在雄性或雌性生殖结构中表达，其特征在于：(i)非毒害植物的物质选自：对非绿色组织有直接植物毒性的非膦酸酯除草剂的酯衍生物，D－α氨基酸，非蛋白质D－α氨基酸的肽衍生物，芳氧基苯氧丙酸类的S－对映体和芳氧基苯氧丙酸的酯衍生物的S－对映体，和(ii)酶选自：羧酸酯酶、D－氨基酸氧化酶、D－氨基酸脱氢酶、D－氨基酸消旋酶、2－芳基丙酰－CoA差向异构酶、α－甲酰基－CoA消旋酶、硫酯酶和酰基－CoA合成酶。 权利要求(20) 1.一种生产雄性或雌性不育植物的方法，该方法包括步骤：用多核苷酸转化植物材料，该多核苷酸编码至少一种与非毒害植物的物质反应产生毒害植物的物质的酶，和将由此转化的材料再生为植物，其中不超过雄性或雌性配子形成和/或成熟的时期，向所述植物施用所述非毒害植物的物质，使得非毒害植物的物质提供毒害植物的物质的产生，该毒害植物的物质选择性地阻止所述配子的形成或使其没有功能，其中所述酶优先在雄性或雌性生殖结构中表达，其特征在于：(i)非毒害植物的物质选自：对非绿色组织有直接植物毒性的非膦酸酯类除草剂的酯衍生物，D-α氨基酸，非蛋白质D-α氨基酸的肽衍生物，芳氧基苯氧丙酸类的S-对映体和芳氧基苯氧丙酸类的酯衍生物的S-对映体，和(ii)所述酶选自：羧酸酯酶、D-氨基酸氧化酶、D-氨基酸脱氢酶、D-氨基酸消旋酶、2-芳基丙酰-CoA差向异构酶、α-甲基酰基-CoA消旋酶、硫酯酶和酰基-CoA合成酶。 2.如权利要求1所述的方法，其中所述非毒害植物的物质与至少一种另外的物质一起混合施用，所述另外的物质选自：安全剂、杀配子剂、谷胱甘肽-S-转移酶诱导物、细胞色素P450诱导物、除草剂、肥料、杀线虫剂、增效剂、杀虫剂、杀真菌剂、激素、植物生长调节剂和细胞色素P450抑制剂。 3.如权利要求1或2所述的方法，其中叶面施用非毒害植物的物质，且该非毒害植物的物质是所述酶的韧皮部可移动的和代谢稳定的可氧化底物，其中该酶提供了做为来源于非毒害植物物质的直接或间接产物的毒害植物的产物。 4.如前述权利要求所述的方法，其中毒害植物的产物是以过氧化物和/或超氧阴离子形式产生的间接产物。 5.如权利要求3或4任一权利要求所述的方法，其中非毒害植物的物质是D-α氨基酸，其选自：D-丙氨酸、D-缬氨酸、D-甲硫氨酸、D-丝氨酸、D-亮氨酸和D-异亮氨酸，所述的酶是D-氨基酸氧化酶或氧化还原酶，其氧化所述氨基酸为2-酮酸，同时伴随着氧原子还原为过氧化物阴离子。 6.如权利要求3或4任一权利要求所述的方法，其中非毒害植物的物质是D-天冬氨酸或D-谷氨酸，所述酶是D-氨基酸氧化酶或氧化还原酶，其氧化所述的氨基酸为2-酮酸，同时伴随氧还原为过氧化物阴离子。 7.如前述权利要求所述的方法，其中酶是从纤细红酶母(Rhodotorula?gracilis)获得的突变D-氨基酸氧化酶，该氧化酶与野生型序列相比，在位置213和/或238包含置换，或者是D-天冬氨酸氧化酶。 8.如前述权利要求所述的方法，其中从红酵母属(Rhodotorula)获得的氧化酶在位置213具有选自Arg，Lys，Ser，Cys，Asn和Ala的氨基酸，和/或在位置238具有选自His，Ser，Cys，Asn和Ala的氨基酸。 9.如权利要求3-8任一权利要求所述的方法，其中所述酶不靶向过氧化物酶体。 10.如权利要求1或2所述的方法，其中所述酶是羧酸酯酶，非毒害植物的物质是咪草酸的酯或氟燕灵的酯。 11.如前述权利要求所述的方法，其中非毒害植物的物质是咪草酸甲酯，氟燕灵甲酯或氟燕灵异丙酯，植物是小麦或本身同样对咪草酸甲酯，氟燕灵甲酯或氟燕灵异丙酯基本上不敏感的植物。 12.如权利要求1或2所述的方法，其中所述酶是D-氨基酸氧化酶、D-氨基酸脱氢酶或D-氨基酸消旋酶，非毒害植物的物质是膦丝菌素的D对映体或双丙氨酰膦的D对映体。 13.如权利要求1或2所述的方法，其中非毒害植物的物质包含在混合物中，该混合物含有毒害植物的物质，其中酶是D-氨基酸氧化酶或氧化还原酶，所述酶能将氨基酸氧化为2-酮酸，同时伴随氧还原为过氧化物阴离子。 14.如前述权利要求所述的方法，其中酶是从纤细红酶母(Rhodotorula?gracilis)获得的突变D-氨基酸氧化酶，该氧化酶与野生型