植物组织的培养方式.pptVIP

第三章 植物组织与器官培养 植物组织培养的基本过程 1).培养材料的选择与采集 2).培养材料的预处理 3).制备外植体 [诱导愈伤组织 悬浮培养 诱导胚性组织] 4).接种和培养 5).根的诱导 6).炼苗移栽 接种 接种时由于有一个敞口的过程，所以是极易引起污染的时期，这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起，接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外，还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾，使空气中灰尘颗粒沉降下来。 无菌操作可按以下步骤进行： (1) 在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室，并打开其内紫外线灯进行杀菌; （2）在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯; （3）接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等; （4）上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工作台面; 　　 （5）先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干; （6）接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等; （7）接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外线灯灭菌30分钟，若连续接种，每5天要大强度灭菌一次。 接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块