分子生物学基础lf.pptxVIP

宏观传统流行病学分子流行病学分子生物学微观宏观与微观相结合！Outline核酸DNARNA（miRNA）染色体基因中心法则核酸重要的生物大分子实验室研究最多的标本类型核酸：脱氧核糖核酸（DNA） 核糖核酸（RNA）碱基腺嘌呤A鸟嘌呤G尿嘧啶U胸腺嘧啶T胞嘧啶C核苷酸的化学组成DNARNA碱基腺嘌呤(adennine,A)鸟嘌呤(guanine,G)胞嘧啶(cytosine,C)胸腺嘧啶(thymine,T)腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶(uracil,U) 戊糖脱氧核糖核糖磷酸磷酸磷酸核酸具有吸收紫外线的特征，其最大吸收波长是260nm，蛋白质紫外最大吸收波长是280nm。可用紫外分光光度计测核酸的浓度还可通过测定在260nm和280nm的紫外吸收值 （A260/A280）估计核酸纯度。纯DNA的比值1.8(1.7-2.0)，纯RNA的比值2.0，蛋白质污染可使比值降低。 遗传信息载体—../df.swfDNA 生物体的遗传信息主要贮藏在DNA DNA的一级结构1）由A、T、C、G四种脱氧核苷酸通过3’、5’-磷酸二酯键连接而成的长链高分子多聚体2) 走向：5’ → 3’DNA的二级结构DNA的碱基组成 1) A=T G≡C 2) A+G=T+C 3) 人基因组约有30亿个碱基对DNA的二级结构 1) 碱基互补配对 2) 反向、平行、右手双螺旋结构DNA的变性 在某些理化因素（高温、酸、碱）作用下，DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂，DNA双螺旋结构松散，变成单链的过程。DNA的复性 变性DNA在适当条件下，分开的两条单链按照碱基互补原则重新恢复双螺旋构想的现象，又称退火（annealing）。RNA主要负责DNA遗传信息的翻译和表达，分子量要比DNA小得多，大多为单链分子。根据RNA的功能： 核糖体RNA (rRNA) 转运RNA (tRNA) 信使RNA (mRNA)mRNAmRNA 转录DNA上的遗传信息，并指导蛋白质的生物合成，是蛋白质的模板与蛋白质合成的正确起始有关增加mRNA的稳定性rRNA tRNA 核糖体mRNA反密码子rRNA RNA总量的80%，核糖体的骨架，蛋白质的主要合成场所tRNA RNA总量的15%，氨基酸受体（识别），携带活化氨基酸（转运）氨基酸新生肽链MicroRNA (1)长度为21nt左右核苷酸的内源性单链小分子RNA；(2)存在65nt左右的发夹结构前体；(3)基因座位在蛋白质基因间隔区；(4)其DNA序列在近源物种间高度保守。miRNA具有十分重要的调控功能，它们主要参与基因转录后水平的调控 。能够通过与靶mRNA的3’UTR特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解（植物）或者抑制其翻译（动物），从而影响了靶mRNA的表达。目前发现miRNA是一个庞大的小分子调控RNA家族，广泛存在于各种动植物中，参与细胞增殖和分化、细胞凋亡、胚胎发育、形态建成以及疾病发生等一系列重要的生命过程。 Serum microRNA signatures identified in a genome-wide serum microRNA expression profiling predict survival of non-small-cell lung cancer. J Clin Oncol. 2010.基因组结构—染色体短臂p着丝粒DNA长臂q染色单体染色体基本单位：核小体核小体：DNA和组蛋白（组蛋白八聚体） 基因基因是一段DNA分子，遗传信息贮存在DNA序列之中；基因是一种相对独立的遗传信息单位，其指导合成蛋白质或RNA，进而产生生理功能，或影响其他基因的表达。严格的“基因”分子生物学定义是：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。基因组 是一种生物所有遗传信息的总和，或载有遗传信息的全体核酸。基因结构 加polyA信号 加帽位点 5m7GpppNp 启动子：RNA聚合酶结合并启动转录的DNA序列(转录因子结合部位) 1）TATA盒：使转录精确地起始（-25～30bp） 2）CCAAT盒：控制转录的起始频率（强度）基因结构增强子：一段能加速基因转录的调节性序列 1）可在基因的上游或者下游，甚至在内含子中。 2）远距离调控5’非翻译区（5’UTR）：mRNA的帽子结构至AUG起始密码子3’非翻译区（3’UTR）：编码区末端终止密码子至3’末端区域外显子：真核细胞基因DNA中的编码序列，被转录成RNA进而翻译成蛋白质内含子：真核细胞基因DNA中的间插序列，被转录成RNA但随即被剪除而不翻译与基因相关的概念与基因相关的概念 基因频率：人群中一个等位基因占该位点全部基因的比例 基因型频率：人群中特定基因型占该位点全部基因型的比例 最小等位基因频率(MAF)：罕见等位基因的频率基因模型显性模型