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- 2019-12-18 发布于浙江
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实验材料不佳或量少 破壁或裂解不充分 沉淀不完全 洗涤时DNA丢失 尽量选用新鲜(幼嫩)的材料 动植物要匀浆研磨充分;G+菌、酵母裂解前先用生物酶或机械方式破壁 高温裂解时,时间适当延长(对于动物细胞、细菌可增加PK的用量) 低温沉淀,延长沉淀时间 加辅助物,促进沉淀 洗涤时,最好用枪头将洗涤液吸出,勿倾倒 DNA提取常见问题 问题三:DNA提取量少。 对 策 原因 猕猴桃DNA提取实例 1.CTAB配方如上,配制好备用,65度水浴预热。猕猴桃叶片或果实采取后最好立即放到液氮中,避免酚类物质氧化 2.65°水浴一个小时 3.氯仿:乙醇:异戊醇=80:16:4的抽提液 两次。10000转/分离心20分钟,尽量把丝状物压紧,避免吸取上清时有丝状物牵拉 等体积预冷的异丙醇 ,75%乙醇洗去其他杂质。洗两次 。 用无水乙醇5毫升洗一次。晾干5分钟挥发掉乙醇后加入3-5mlTE溶解,加入5ul,1mg/ml的RNA酶后保存 猕猴桃基因组DNA DNA提取方法简介 DNA提取的几种方法 基因组DNA的提取 CTAB法 SDS法 其它 DNA提取的几种方法 非基因组DNA的提取 质粒DNA的提取 碱裂解法 煮沸法 线粒体、叶绿体DNA的提取 差速离心结合SDS裂解法 基因组DNA- CTAB法 CTAB法原理(植物DNA提取经
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