瘦肉型猪遗传改良新技术.ppt

建立最佳遗传资源保护模式 增加高产优秀个体的“复制品”数量 遗传同质群体便于标准化生产 遗传同质动物是最好的试验材料 为发展其它生物技术提供了最佳手段 动物克隆技术的应用领域 分子层面的生物技术与动物育种 转基因技术 转基因超级鼠 1982年，英国的《自然》杂志发表了一篇文章：有两个美国实验小组利用转基因技术，将大鼠生长激素重组基因导入到小鼠受精卵中,培育出具快速生长效应的“转基因超级鼠”。转基因鼠比与它同胎所生的小鼠生长速度快2～3倍，体积大一倍。 东北农业大学刘忠华教授带领的课题组，把水母绿色荧光蛋白基因转移到猪胎儿成纤维细胞的基因组中，再把转基因体细胞的细胞核移植到成熟的去核猪卵母细胞中构建成转基因胚胎。再将其植入受体母猪，经过114天的发育，2006年12月22日成功培育出国内首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪 中国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪问世 转基因技术： 1）将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰，称之为转基因技术。 2）指利用分子生物学技术，将某些生物的基因转移到其它物种中，改造生物的遗传物质，使遗传物质得到改造的生物在性状、营养和消费品质等方面向人类需要的目标转变。 转基因动物： 指以实验方法将外源基因导入动物染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。 转基因技术的应用 可大大改进生产性能 可实现抗病育种 产生新的代谢途径，从而提高其生产性能 可改进动物产品的质量 可使动物获得乳腺生物反应器 建立毒理试验的动物模型 在人类医学研究中也有广阔的由于领域 四个主要国家转基因作物种植面积占全球９９％。 美国占６６％，达３９００万公顷，转基因作物产量也居世界第一，美国种植的７５％的大豆、３４％的棉花和７１％的玉米都是转基因作物。 阿根廷占２３％，达１３５０万公顷。 加拿大占６％，达３５０万公顷。 中国第四位，占４％，达２１０万公顷。 欧盟国家总面积不到２０万公顷，０.３％左右。 四个转基因作物种植大国 存在问题 食品安全问题 1）未知的可能副作用？ 2）外源基因在人体内表达？ 技术问题 1）成本高； 2）成功率低； 3）基因组的有效整合、稳定遗传问题； 分子遗传标记技术 分子遗传标记指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异特征的DNA片段，它直接反映基因组DNA间的差异。 分子标记的优越性表现为：（1）直接以DNA的形式表现，在生物体的各个组织、各个发育阶段均可检测到，不受季节、环境限制，不存在表达与否等问题；（2）数量极多，遍布整个基因组，可检测座位几乎无限；（3）多态性高，自然界存在许多等位变异，无须人为创造；（4）表现为中性，不影响目标性状的表达；（5）许多标记表现为共显性的特点，能区别纯合体和杂合体。 分子标记的三个阶段 随着分子生物学技术发展和研究水平的深入，分子标记的发展经历了三个阶段，也称为三代DNA分子标记。 第一代分子标记：RFLP 第二代分子标记：微卫星（ms） 第三代分子标记：SNP 目前的分子标记类型 第一类是以分子杂交为核心的分子标记技术，包括RFLP、DNA指纹技术原位杂交等； 第二类是以PCR为核心的分子标记技术，包括RAPD、简单序列重复标记SSR或简单序列长度多态性、扩展片段长度多态性标记AFLP、序标位STS、序列特征化扩增区域SCAR等； 第三类是一些新型的分子标记，如：SNP标记、表达序列标签EST标记等。 1、RFLP 基本原理：特定生物类型的基因组DNA经限制性内切酶切后，产生分子量不同的同源等位片段，再通过电泳的方法分离和检测这些片段。 特点：（1）遍布于整个基因组，数量几乎是无限的；（2）无表型效应，不受发育阶段及器官特异性限制；（3）共显性，可区分纯合子和杂合子；（4）结果稳定、可靠；（5）DNA需要量大，检测技术繁杂，难以用于大规模的育种实践中。 2、RAPD 基本原理：用一个（有时用两个）随机引物（一般8-10个碱基）非定点地扩增基因组DNA，然后用凝胶电泳分开扩增片段。 RAPD标记的特点有：（1）不需DNA探针，设计引物也无须知道序列信息；（2）显性遗传（极少数共显性），不能鉴别杂合子和纯合子；（3）技术简便，不涉及分子杂交和放射性自显影等技术；（4）DNA样品需要量少，引物价格便宜，成本较低；（5）实验重复性较差，结果可靠性较低。 3、AFLP 基本原理：AFLP标记是选择性扩增基因组DNA酶切片段所产生的扩增产物的多态性，其实质也是显示限制性内切酶酶切片段的长度多态性，只不过这种多态性是以扩增片段的长度不同被检测出来。 AFLP标记的特点有：（1）由于AFLP分析可以采用的限制性内切酶及选择性碱基种类、数目很