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UF-500i尿沉渣分析仪测定红细胞影响因素探讨
【摘要】目的:对UF-500i尿沉渣分析仪检测尿液中红细胞假阳性、假阴性结果进行分析,正确理解显微镜镜检的临床意义。方法:对500例尿沉渣分析仪红细胞结果显示为阳性的患者标本进行显微镜镜检。结果:尿沉渣分析仪红细胞结果显示为阳性的500例显示阳性的标本,进行显微镜镜检发现假阳性为73例、假阴性42例。结论:UF-500i尿沉渣分析仪对尿样中红细胞的计数存在一定的干扰因素,若机器出现报警时或红细胞计数多时,必须用镜检确认。
【关键词】尿沉渣分析仪;显微镜镜检;红细胞
【中图分类号】R446.12【文献标识码】B文章编号:1004-7484(2012)-04-0339-02
UF-500i型尿沉渣分析仪具有操作简便,结果重复性好等特点,并可对尿样直接做荧光染色后,利用流式细胞原理识别和计数尿中红细胞、霉菌、白细胞等有形成份。但该仪器对尿样中红细胞计数也存在一些干扰因素,现探讨如下:
1.资料与方法
1.1仪器与试剂:采用UF-500i型全自动尿沉渣分析仪(日本Sysmex公司)及其配套使用的专用试剂,OLYMPUS显微镜。
1.2样本来源:抽取我院2012年9月-2012年2月门诊和住院500例尿沉渣分析仪红细胞结果显示为阳性的患者标本。
1.3方法:全自动UF-500i尿液分析仪检测:取一管新鲜中段尿10ml于专用测试管内待测。仪器在测定前校准和做质控后方可进行测试。显微镜检测:同时取另一管新鲜中段尿10ml,RCF400×g,离心5min,离心后倾倒或吸去上清液,保留0.2ml尿沉渣镜检。
2.结果(见表1)
3.讨论
尿液分析是一项非常重要的医学实验,是三大常规实验之一,过去称为尿常规实验。以前以手工操作方法为主,随着科技的发展,现逐步被各种检测仪器所代替。近年来尿沉渣自动分析仪在各个医院临床实验室得到广泛的应用,已经是尿液常规检测的重要仪器。日常工作中大家会认真按操作程序进行质量控制及操作,但是,工作中虽然仪器工作状态正常,质控在要求范围内,我们不能认为病人的检测结果就一定正确,必须考虑尿沉渣自动析仪器在红细胞和霉菌检测时易出现假阳性问题和假阴性问题,否则我们发出的检测报告可能是错误结果。在临床实际工作中,尿沉渣自动分析仪只能作为尿常规试验的筛查试验。当UF-500i尿沉渣自动分析仪与干化学分析仪出现阳性结果时,必须坚持与镜检结果及其他实验结果结合分析,然后才能发出检测报告。
尿全自动沉渣分析仪与尿沉渣显微镜计数的原理不同,所得的结果自然也不同。尿全自动沉渣分析仪是尿液直接做荧光染色后,利用激光流式细胞和电阻抗分析原理[1],尿液中细胞等经过荧光染色后,在鞘流液的作用下形成单个、纵列细胞流,通过激光测试区仪器检测荧光、散射光、电阻抗的变化。当仪器在捕获荧光强度、荧光脉冲宽度、前向散射光强度、前向散射光脉冲宽度和电阻率,就可以识别和计数尿中红细胞,霉菌,白细胞等有形成份。这与显微镜检测方法是通过显微镜的放大作用,将细胞,霉菌等有形成分直观、真实地呈现在镜下相比,大幅度提高了尿沉渣的工作效率,同时还能对细胞、细菌进行定量分析,使尿液分析标准化,受到广大检验工作者欢迎。
尿液红细胞检测是临床对诊断泌尿系疾病,特别是肾脏疾病诊断的重要实验指标之一,在肾脏疾病的诊断、病情进展和预后的判断中有重要的意义,进行精确的红细胞定量分析是进一步研究其临床意义的关键[2]。虽然UF-500i尿沉渣分析仪能对尿中的红细胞进行定量分析,但UF-500i检测尿液红细胞受较多因素的影响,如尿渗透压、菌尿、尿PH值等均会导致尿液红细胞的形态的改变。肾脏的肾小管内渗透压浓度的变化是造成尿红细胞形态变化的主要因素。当尿渗透压增高,且PH增高为碱性尿时,红细胞膜脂质外层面积增加,红细胞会呈锯齿形红细胞或棘形红细胞,使仪器无法正确识别。渗透压低时,PH降低呈酸性尿时,红细胞膜脂质内层面积增加,出现可逆口形红细胞或红细胞肿胀溶解或出现面包圈样,戒形红细胞,从而使红细胞计数结果异常。
另外由于尿中一些细菌、霉菌、结晶体(以哑铃型结晶为主)等在形态、大小、染色上与红细胞类似,仪器不能完全排除这些因素对红细胞计数的干扰,可使细胞计数结果呈假性增高[3]。尿沉渣分析仪检测红细胞是根据红细胞没有细胞核,仪器根据荧光强度低和前向散射光强度低将其归为红细胞。细菌虽然有核,而且体积相对与红细胞来说很小,单细菌的核上色很难,所以仪器容易把红细胞和细菌分开。当尿中的细菌成堆时,成堆的细菌在散射图上的分布与红细胞分布区域发生交叉,仪器对红细胞的检测会产生误差。霉菌虽然也有核,但菲啶染料对膜的通透性低,染色后霉菌的荧光强度和前向散射光强度也低(比红细
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