厚壳贻贝MyD88-4基因的生物学特性及其对沙氏弧菌的免疫应.PDFVIP

厚壳贻贝MyD88-4基因的生物学特性及其对沙氏弧菌的免疫应.PDF

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第43 卷 第 11 期 水 产 学 报 Vol. 43, No. 11 2019 年 11 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Nov., 2019 文章编号: 1000-0615(2019)11-2347-12 DOI: 10.11964/jfc.20190111611 厚壳贻贝MyD88-4基因的生物学特性及 其对沙氏弧菌的免疫应答 1,2,3 1,2 1,2 1,2,3 1,2,3* 梁 箫 , 刘钰珠 , 陈 珂 , 李一峰 , 杨金龙 (1. 上海海洋大学,国家海洋生物科学国际联合研究中心,上海 201306 ; 2. 上海海洋大学,水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海 201306 ; 3. 上海海洋大学,水产科学国家级实验教学示范中心,上海 201306) 摘要:为理解髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)基因的生物学特性 以及对细菌胁迫的响应,本研究克隆了厚壳贻贝MyD 88基因(命名为McMyD 88-4)cDNA全 长序列,其全长3 930 bp ,开放阅读框2 607 bp ,编码868个氨基酸。其中,13~109位的氨 基酸序列为死亡结构域(death domain ,DD) ,347~481位的氨基酸序列为TIR(toll/interleukin- 1 receptor)结构域,TIR结构域包含3个高度保守的区域Box 1 、Box 2和Box3 ;McMyD88- 4 蛋白的空间结构包含6 个α 螺旋(α-helix) 和4 个β 折叠(β-sheet) 。同源性分析显示, McMyD88-4蛋白序列与长牡蛎MyD88最相似,其一致性和相似性分别为60 %和77 % ;其 次,与虾夷扇贝、海湾扇贝和菲律宾蛤仔相似度较高,其一致性和相似性分别为40%~ 51%和58%~67% 。系统进化树结果显示,McMyD88-4先与长牡蛎和扇贝聚为一支,然后 与黑腹果蝇聚为一支,脊椎动物单独聚为一支。实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 检测发 现,McMyD 88-4基因在厚壳贻贝各组织和器官中均有表达,其中在外套膜和鳃中的表达 量最高,而血细胞中表达量最低。厚壳贻贝经沙氏弧菌感染后,McMyD 88-4基因表达量 在免疫相关组织中急剧上升,分别在感染后3和6 h达到峰值,且在消化腺中的上调水平 显著高于鳃和外套膜。研究表明,McMyD 88-4在厚壳贻贝抵御外界病原体侵染过程中, 尤其是弧菌感染方面发挥重要作用。 关键词: 厚壳贻贝;髓样分化因子88(MyD88) ;基因克隆;组织表达;弧菌感染 中图分类号: Q 786 ;S 968.31 文献标志码: A 先天免疫是多细胞生物进行宿主防御的第 88(myeloid differentiation factor 88 ,MyD88)是 一道防线,当宿主的模式识别受体(pattern recog- TLRs信号通路中关键接头蛋白,在信号传递中

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