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氨基酸和蛋白质性质 实验结果 * 掌握氨基酸和蛋白质的化学性质 掌握氨基酸和蛋白质的鉴别方法 实验目的 实验原理 氨基酸是一类既含有氨基又含有羧基的两性化合物。?-氨基酸是组成蛋白质的基本单位。 茚三酮反应 蓝紫色 亚硝酸反应 一、氨基酸的性质 1 茚三酮反应:蓝紫色 2 硝酸黄色反应:含有苯环侧链的蛋白质溶液与硝酸共热时,苯环被硝化而显黄色 3 缩二脲反应:蛋白质肽键结构,碱性溶液中加入少许硫酸铜,溶液显紫红色 二、蛋白质的性质 (一)显色反应 (二)盐析 因加入大量无机盐使蛋白质从溶液中沉淀析出的作用称为盐析。析出的蛋白质仍保持其原有的性质,当降低盐的浓度时,还能溶解。蛋白质的盐析作用是可逆过程。 (三)沉淀反应 蛋白质因受物理因素(如加热)或化学因素(如有机物,重金属盐等)的影响,改变或破坏蛋白质分子空间结构,导致其生物活性丧失以及理化性质改变,这种现象称为蛋白质的变性。 仪器: 试剂: 常备性质实验仪器、离心机。 丙氨酸溶液(2 g·L-1)、茚三酮溶液(2 g·L-1)、盐酸(100 g·L-1)、亚硝酸钠溶液(50 g·L-1)、浓硝酸、氢氧化钠溶液(50 g·L-1)、硫酸铜溶液(30 g·L-1)、氯化汞溶液(30 g·L-1) 、醋酸铅溶液(30 g·L-1)、硝酸银溶液(30 g·L-1)、硫酸铵粉末、饱和硫酸铵溶液、95%乙醇、三氯乙酸(100 g·L-1)、苦味酸、蛋白质溶液。 实验仪器与试剂 (一)氨基酸的性质 实验步骤(观察并记录现象) 丙氨酸固体+ 0.5mlHCl(10%)+1.5ml亚硝酸钠,观察并记录气体冒出速率 亚硝酸反应 10d丙氨酸+ 3d茚三酮,沸水浴5~10m 鉴别反应 操作步骤 反应类型 (二)蛋白质的性质 2ml蛋白质沸水浴5m 加热 5d蛋白质+Hg2+/Pb+/Ag+/Cu2+各3d 重金属 5d蛋白质+1dHCl(10%)+三氯乙酸/苦味酸各2d 有机酸 5d蛋白质+10d乙醇 乙醇 沉淀反应 2ml蛋白质+ 2ml(NH4)2SO4溶液,混匀静置10m,离心,小心取上清液,沉淀① 上清液+(NH4)2SO4粉末搅拌至粉末不再溶解,静置10m,离心,沉淀② 沉淀①/沉淀②各加2ml水 盐析 盐析 5d蛋白质+5dNaOH+2dCuSO4,水浴加热 缩二脲反应 5d蛋白质+2d硝酸,白色沉淀后沸水浴 硝酸黄色反应 10d蛋白质+3d茚三酮,沸水浴5~10m 茚三酮反应 显色反应 实验步骤 反应类型 (二)蛋白质的性质(观察并记录现象)
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