rna生物合成和加工08.pptxVIP

遗传信息传递的 中心法则;第一节 DNA指导下RNA的合成;1. DNA指导的RNA聚合酶;;大肠杆菌RNA聚合酶（456 kD);转录泡，17bp;RNA合成过程;真核生物的RNA聚合酶 三种RNA聚合酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,它们专一地转录不同的基因,其转录过程和产物各不相同。三种RNA聚合酶对鹅膏覃碱的敏感性反应不同。;2.启动子和转录因子;;;大肠杆菌启动子共有序列; 真核启动子 分为类型I、II、III，分别由RNA pol I、II、III进行转录。 类型I、III启动子种类有限，分别控制rRNA前体基因和小分子RNA的转录。;类型I启动子由两部分保守序列组成： 核心启动子位于转录起始点附近（－45—＋20）。 上游控制元件（UCE）位于－180—－107。 两部分都富含GC。; 类型II启动子 类型II启动子涉及众多蛋白质基因的表达控制。包括4类控制元件： 基本启动子 起始子 上游元件 应答元件 由相应的转录因子识别。 基本启动子序列中心在-25至-30左右，7bp保守区。称TATA框（TATA box）或Goldberg-Hogness框。 A63 A60 T82A97T93 A85A82 A37 T37;通用（基本）转录因子 通用转录因子（TFII）:指在启动子部位与RNA聚合酶II形成起始复合物（作用于基本启动子），启动转录的蛋白质因子，含量丰富，种类较少 。为所有类型II启动子起始转录所必需。 ; TATA框是RNA Pol II和通用因子形成起始复合物的主要装配点。转录的起始位点处有一保守序列称起始子（initiator, Inr)， DNA在此解开并开始转录，其共有序列为： ;;CAAT框 中心在-75处，9bp，共有序列GGT（G）CAATCT 功能：与RNA聚合酶结合 GC框 在CAAT框上游，序列GGGCGG，与某些转录因子结合。 CAAT和GC框均为上游序列，对转录的起始频率有较大影响。 ;类别III启动子（为RNA pol III所识别） 涉及小分子RNA，如：5S和tRNA，scRNA的转录。它位于转录起始点下游，也就是基因内部。;3. 终止子和终止因子;;第23页/共82页;4. RNA生物合成的抑制剂;第二节 RNA转录后的加工; 细胞内的tRNA、rRNA相对稳定，半衰期一般为几个小时。所有的tRNA、rRNA都不是原初转录产物，都要经过一系列的加工才能成为有活性的分子。 原初转录产物的5’是三磷酸（pppG??pppA）， 而成熟的tRNA、rRNA ，5’是单磷酸。 成熟 tRNA、rRNA分子都比原初转录物小。 所有的tRNA分子，都有原初转录物所没有的稀有碱基（A、G、C、U以外的碱基）。; 真核的mRNA多为单顺反子，含有多内含子。寿命比原核mRNA的长。在原初转录物中，通过RNA拼接反应而被去除的RNA序列。 原核mRNA为多顺反子，半衰期只有几分钟，一经转录即直接进行翻译，一般不需加工。但少数多顺反子mRNA需经过核酸内切酶作用，切成较小的单位后再进行转录，如：核糖体大亚基蛋白L10和L7/L12与RNA Pol b，b’亚基基因组成的混合操纵子。;1.? 原核生物RNA的加工 rRNA前体的加工 在原核生物中，rRNA基因与某些tRNA基因组成混合操纵子，可提高效率、节省空间（增加有效信息）。其它的tRNA基因也成簇存在，并与编码蛋白质的基因组成操纵子，它们在形式多顺反子转录物后，断裂成为rRNA和tRNA的前体，然后进一步加工成熟。 ; E.coli共有三种rRNA 5S rRNA、16S rRNA、23S rRNA rRNA原初转录物含6300个核苷酸，约30S。 E.coli有7个rRNA的转录单位（操纵子），它们分散在基因组的各处。每个转录单位由16SrRNA、23SrRNA、5SrRNSA以及一个或几个tRNA基因所组成。每个操纵子中tRNA基因的种类、数量和位置都各不相同。;;原核tRNA前体的加工 E.coli染色体基因组有60个tRNA基因，即某种a.a. 的tRNA基因不止一个拷贝。tRNA基因大多成簇存在， 或与rRNA基因，或与蛋白质基因组成混合转录单位。 tRNA前体加工步骤： 核酸内切酶(RNaseP、RNaseF)在tRNA两端切断。 核酸外切酶(RNaseD)从3’端逐个切去附加序列。 在tRNA3’端加上-CCA-OH。 核苷的修饰（修饰酶):甲基化