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第 周 月 日 星期 PAGE PAGE 1 第一节　基因工程概述 第1课时　基因工程的发展历程和工具 教学目标：1.结合教材P7～9，简述基因工程的发展历程。 2.结合教材P9～12，举例说出限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用、特点。 3.概述质粒的含义、特性及其在基因工程中的作用。 教学重难点：基因工程的基本工具的作用和特点。 教学过程： 导课： 方式一　抗虫棉的研究开发是我国发展农业转基因技术，打破跨国公司垄断，抢占国际生物技术制高点的成功事例。抗虫棉的应用使棉铃虫得到了有效控制，使杀虫剂用量降低了70%～80%，有效保护了农业生态环境，减少了农民喷药中毒事故，为棉花生产和农业的可持续发展做出了巨大贡献。 师：要实现抗虫基因在棉花中的表达，提前要做哪些关键工作？ 生：要将抗虫基因切割下来；要将抗虫基因整合到棉花的DNA上。 师：这里存在一个基因转移的实际问题，就是如何将控制抗虫的基因转入棉花细胞的问题。 师：中国有句俗语叫“没有金刚钻儿，不揽瓷器活儿”。科学家们在实施基因工程之前，苦苦求索，终于找到了实施基因工程的三种“金刚钻儿”，使基因工程的设想成为了现实。这三种“金刚钻儿”是什么？有什么特点和具体作用？下面我们就来学习这方面的内容。 方式二　科学设想，能否让禾本科植物也能固定空气中的氮？能否让细菌“吐出”蚕丝？能否让微生物产生人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？经过多年努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。这一技术是在DNA分子水平上进行的，在微小的DNA分子上进行的操作，需要专用的工具。这些工具是什么？各自的作用是什么？让我们一起来了解一下吧！ 新授： 一、基因工程的发展历程 1．理论与技术基础的发展 1953年：沃森和克里克建立DNA分子双螺旋结构模型。 ↓ 1957年：科恩伯格等首次发现DNA聚合酶。 ↓ 1958年：梅塞尔森和斯塔尔发现DNA半保留复制的机理。克里克提出中心法则。 ↓ 1961～1966年：尼伦伯格等破译遗传密码。 ↓ 1967年：罗思和赫林斯基等发现运转工具质粒和DNA连接酶。 ↓ 1970年：特明和巴尔的摩各自在RNA病毒中发现逆转录酶。史密斯等人分离到限制性核酸内切酶。 ↓ 1977年：桑格首次完成基因组的测序工作。 2．重组DNA技术的发展 (1)1972年科学家伯格等实验 ①过程 eq \b\lc\ \rc\](\a\vs4\al\co1(猿猴病毒SV40的DNA ?,　　↑, 同一种限制性核酸内切酶,　　↓, λ噬菌体的DNA ?))eq \o(――――→,\s\up7(DNA连接酶),\s\do5(　))重组的杂种DNA 分子 ②成就：世界上首次DNA分子体外重组。 (2)1973年科学家科恩等实验 eq \b\lc\ \rc\](\a\vs4\al\co1(大肠杆菌质粒DNA,?含卡那霉素抗性基因?,　　↑,同一种限制性核酸内切酶,　　↓,另一种大肠杆菌质粒DNA,?含四环素抗性基因?))eq \o(――――→,\s\up7(DNA连接酶),\s\do5(　))重组DNA分子 eq \o(――→,\s\up7(转化),\s\do5(　))大肠杆菌―→子代大肠杆菌(双重抗性) (3)不同物种间DNA重组实验 ①过程：非洲爪蟾核糖体蛋白基因的DNA片段＋大肠杆菌质粒―→重组DNA―→大肠杆菌―→转录出相应mRNA。 ②成就：打破了传统的种间遗传物质不能交换的重重壁垒，开创了基因工程。 3．基因工程的概念 方法 人工“剪切”和“拼接”等 原理 对生物的基因进行改造和重新组合(基因重组) 操作水平 基因(分子)水平 目的 产生人类需要的基因产物 操作环境 体外 优点 定向改造生物的遗传性状 二、基因工程操作的两种工具酶 1．“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(又称限制酶) (1)来源：主要从原核生物中分离出来。 (2)特点：具有特异性(专一性)。 ①识别DNA分子上特定的脱氧核苷酸序列。 ②断开每条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 (3)识别序列 ①组成：大多数由6个核苷酸组成。 ②特点：一般具有回文序列。 (4)作用结果：产生黏性末端或平口末端。 2．“分子针线”——DNA连接酶 (1)作用：连接DNA分子基本骨架之间的磷酸二酯键。 (2)结果：形成重组DNA分子。 三、基因工程中的工具——载体 1．常用的载体：质粒、λ噬菌体的衍生物、动、植物病毒等。质粒是最早应用的载体，它是细菌细胞中的一类祼露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状DNA分子。 2．质粒的基本结构 (1)重组质粒进入受体细胞后要扩增产生更多的带有目的基因的质粒，因此应