可以对寡核苷酸测序.pptVIP

第 三 节 核 酸 序 列 分 析Nucleic Acid Sequence Analysis  钟树荣副教授 昆明医科大学法医学院;DNA序列测定（Determination of DNA sequence ）;DNA测序技术（DNA sequencing technology ）;测序（sequencing ）的常用方法;一、化学裂解法(Maxam-Gillbert法); 化学裂解法测序（Chemical pyrolysis sequencing ）的原理;表----特异断裂4种脱氧核苷酸的方法;在4种反应体系中，化学试剂特异地断裂DNA的机制是： G反应----硫酸二甲酯（DMS）使GN7甲基化，其后断开了C8-C9间的化学键，哌啶置换了被修饰鸟嘌呤与核糖的结合。 G+A反应----（哌啶）甲酸使嘌呤环上氮原子质子化，削弱了嘌呤脱氧核糖核苷酸和腺嘌呤脱氧核糖核苷酸的糖苷键，然后哌啶置换了嘌呤。 T+C反应----肼断开了嘧啶环，产生碱基片段被哌啶置换。 C反应----在NaCl存在时，只有C才能与肼发生反应，随后，被修饰的胞嘧啶被哌啶置换。;碱基特异性修饰及裂解 （Base s