免疫分析前用注射泵把酪蛋白溶液吸入芯片通道内,对通道内壁进行封闭处理1 h后,用磷酸盐缓冲溶液取代酪蛋白溶液对管道进行清洗,再将聚苯乙烯微珠的悬浊液吸入微通道内,微珠便被围堰截获。反应结束后,由激光热透显微镜对吸附在聚苯乙烯小球上的金胶进行检测。 实验结束后,可以改变磷酸盐缓冲液的流向,将微珠从微通道内移出,因此这种微流控芯片可以重复使用。Sato等在这种芯片上采用直接法测定分泌的人免疫球蛋白A,常规非均相免疫分析常在滴定板内进行,抗体-抗原反应达到平衡所需要的时间是10-20 h,而在芯片上达到平衡的时间仅为10 min。 Sato解释了芯片上免疫分析速度快的原因:采用微珠免疫反应,固相载体的比表面积明显增大;扩散距离缩短,溶液中的抗原或抗体扩散至固相载体表面的时间明显缩短。微芯片上的免疫分析,除了分析时间大大缩短外,微珠免疫吸附反应、免疫反应和清洗工作都可由注射泵控制,操作简便。 Lai等建立了具有24组检验功能的CD光盘式PMMA酶联免疫分析(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA)微流控芯片平台(图6.16)。 图6.16 具有24组检验功能的CD塑料光盘式酶链免疫分析微流控芯片系统 (a)24阵列酶联免疫分析装置示意图;(b)单个酶联免疫分析单元; (c) 单个酶联免疫
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