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生物选修一 微生物实验室培养
一.解答题(共30小题)
1.(2014?江西校级二模)【生物﹣﹣选修1生物技术实践专题】
从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定.富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法.
(1)接种前要对培养基进行 处理.在整个微生物的分离和培养过程中,一定要注意在 条件下进行.
(2)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化.如培养纤维素分解菌的菌样应从 环境中采集.
(3)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制 培养基,该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的 .
(4)经过梯度稀释后,要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是 ,当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生 来筛选纤维素分解菌.某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是 .
2.(2014?凉州区模拟)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验.实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数.请回答与此实验相关的问题.
(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和 .除此之外,培养基还必须含有的基本成分是 和 .
(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 .
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于 中培养,培养的温度设定在37℃.要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验.
(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有 种细菌.一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越 .
(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐 细菌,这种培养基(按功能分)被称为 .
3.(2015?咸阳二模)烧伤病人容易感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头抱菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物.临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验.实验时,从病人身上获取少量样本,按照一定的实验步骤操作,以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性.
(1)获取绿脓杆菌单菌落:配制适于绿脓杆菌生长的培养基,培养基中的营养成分一般含有 、 、水和无机盐,调节pH至7,灭菌处理,待培养基冷却至50℃时,在 附近倒平板.经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落.
(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释,用 法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板.将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头抱菌素和碳青霉烯类抗生素的同大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,适宜条件培养一段时间,结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈,这说明绿脓杆菌对上述抗生素 ;含头抱菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,这说明
;含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,请推测此菌落产生的可能原因:一是 ,二是 .
(3)根据上述实验结果,为达到抗绿脓杆菌的目的,对于该患者来说最好应选用抗生素 .
4.(2015?山东模拟)多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用,是土壤、河水中常见的污染物之一.如图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤.请回答:
(1)步骤①→③的培养过程中,需将锥形瓶放在摇床上振荡,一方面使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;另一方面能 .
(2)步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是 .采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是
(3)接种环通过灼烧来灭菌,完成步骤④中划线操作,共需灼烧接种环 次
(4)为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株,研究人员又对菌种Q进行了诱变处理,得到突变株K.为了进一步鉴定菌株K并比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力,设计了下列实验,请补全实验步骤:
①取9只锥形瓶均分成三组,编号A、B、C
②向A、B、C三组锥形瓶中加入 的培养液.
③向A、B、C三组培养液中分别加入 .
④28℃恒温培养3天后,测定
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