样品的采集包装与送检.docVIP

国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库 PAGE 5 样品的采集、包装与送检 一、样品采集的一般原则和采集前的准备 1．样品采集所遵循的一般原则 凡发现患畜（包括马、牛、羊及猪等）有急性死亡时，如怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患畜的血液，万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。采取病料的种类，根据不同的疾病或检验目的，采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料；进行流行病学调查、抗体检测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品的数量应满足统计学的要求。采样时应小心谨慎，以免对动物产生不必要的刺激或损害和对采样者构成威胁。在无法估计病因时，可进行全面的采集。检查病变与采集病料应统筹考虑。 内脏病料的采取，如患畜已死亡，应尽快采集，最迟不超过6h；血液样品在采集前一般禁食8 h；应做好人身防护，严防人畜共患病感染。应防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和病害肉尸的处理。 2．使用器械的消毒 刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min，使用前用酒精擦拭，用时进行火焰消毒。器皿（玻制、陶制等）经103 kPa高压30min，或经160℃干烤2h灭菌；或放于0.5%～1%的碳酸氢钠水中煮沸10～15min，水洗后，再用清洁纱布擦干，保存于酒精、乙醚等溶液中备用。注射器和针头放于清洁水中煮沸30min。一般要求使用“一次性” 二、样品的采集 1．血液 采血部位 大的哺乳动物可选用颈静脉或尾静脉采血，也可采胫外静脉和乳房静脉血。毛皮动物小量采血可穿刺耳尖或耳壳外侧静脉，多量采血可在隐静脉采集，也可用尖刀划破趾垫至一定深度或剪断尾尖部采血。啮齿类动物可从尾尖采血，也可由眼窝内的血管丛采血；兔可从耳背静脉、颈静脉或心脏采血。禽类通常选择翅静脉采血，也可通过心脏采血。 （1）采血方法 对动物采血部位的皮肤先剃毛（拔毛），75%的酒精消毒，待干燥后采血，采血可用针管、针头、真空管或用三棱针穿刺，将血液滴到开口的试管内。禽类等的少量血清样品的采集，可用塑料管采集。用针头刺破消毒过的翅静脉，将血液滴到直径为3～4 mm的塑料管内，将一端封口。 （2）采血种类 进行血液学分析，细菌、病毒或原虫培养，通常用全血样品。样品中加抗凝剂。抗凝剂可用0.1%肝素、阿氏液（红细胞保存液，使用时，以1份血液加2份阿氏液），或枸椽酸钠（3.8%～4%的枸橼酸钠0.1ml，可抗1ml血液）。采血时应直接将血液滴入抗凝剂中，并立即连续摇动，充分混合。也可将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内，震荡脱纤维蛋白。需采集血浆时，在采血试管内先加上抗凝剂（每10ml血加柠檬酸钠0.04～0.05g），血液采完后，将试管颠倒几次，使血液与抗凝剂充分混合，然后静置，待细胞下沉后，上层即为血浆。 2．一般组织 用常规解剖器械剥离死亡动物的皮肤，体腔用消毒的器械剥开，所需病料按无菌操作方法从新鲜尸体中采集。剖开腹腔后，注意不要损坏肠道。进行细菌、病毒、原虫等病原分离所用组织块的采集，可用一套新消毒的器械切取所需器官的组织块，每个组织块应单独放在已消毒的容器内，容器壁上注明日期、组织或动物名称。注意防止组织间相互污染。用于微生物学检验的病料应新鲜，尽可能的减少污染。用于细菌分离的样品的采集，首先以烧红的刀片烫烙脏器表面，在烧烙部位刺一孔，用灭菌后的铂耳伸入孔内，取少量组织或液体，作涂片镜检或划线接种于适宜的培养基上。 3．肠道组织、内容物或粪便 选择病变最明显的肠道部分，通过灭菌生理盐水冲洗弃去其中的内容物，取肠道组织；取肠内容物时，烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取内容物放入盛有灭菌的30%甘油磷酸缓冲盐水保存液中送检。或将带有粪便的肠管两端结扎，从两端剪断送检。从体外采集粪便，应力求新鲜。或用拭子小心地插到直肠黏膜表面采集粪便，然后将拭子放入盛有灭菌的30%甘油磷酸缓冲盐水保存液中送检。 4．胃液及瘤胃内容物 （1）胃液采集 胃液可用多孔的胃管抽取。将胃管送入胃内，其外露端接在吸引器的负压瓶上，加负压后，胃液即可自动流出。 （2）瘤胃内容物采集 反刍动物在反刍时，于食团从食道逆入口腔时，立即开口拉住舌头，另一只手深入口腔即可取出少量的瘤胃内容物。 （3）牛、羊食道-咽部分泌物（O-P液） 被检动物在采样前禁食（可饮水）12h，以免反刍胃内容物严重污染O-P液。采样用的特制探杯在使用前经0.2%柠檬酸或2%氢氧化钠溶液浸泡5min，再用与动物体温一致的自来水冲洗。每采完一头动物，探杯都要重复进行消毒和清洗。采样时动物站立保定，操作者左手打开牛口腔，右手握探杯，随吞咽动作将探杯送入食道上部10～15cm处，轻轻来回移动2～3次，然后将探杯拉出。如采集的O-P液被反刍胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。