应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量.PDFVIP

676 生 物 工 程 学 报 徐嫄 等/应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的 146S 抗原含量 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn May 25, 2018, 34(5): 676−684 DOI: 10.13345/j.cjb.170392 ©2018 Chin J Biotech, All rights reserved ·动物及兽医生物技术· 146S 1 1 1 1 1 2 2 2 徐嫄 ，邹兴启 ，李翠 ，朱元源 ，何天慈 ，杨延丽 ，林旋 ，宋艳民 ， 3 2 1 郑金来 ，张松平 ，赵启祖 1 100081 2 100190 3 102600 嫄, , , . 146S . , 2018, 34(5): 676–684. Xu Y, Zou XQ, Li C, et al. Using size-exclusion chromatography to quantify the 146S antigen in inactivated foot-and-mouth disease vaccine. Chin J Biotech, 2018, 34(5): 676–684. 摘 要: 旨在应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量。使用TSKgel G4000SWXL (7.8 mm×30 cm) 色谱柱，以pH 7.2 的缓冲盐体系作为流动相，流速为0.6 mL/min ，进样量为100 μL ，检测波长为259 nm 。以口 蹄疫病毒 (O 型) 灭活146S 抗原纯化样品建立标准曲线；使用灭活抗原液配制3 份口蹄疫灭活疫苗，并进行精密度、 重复性、特异性、耐受性验证；应用该方法快速测定16 批疫苗的 146S 含量。结果表明，抗原浓度在0.56–67.42 μg/mL 范围内，其峰面积与浓度的线性关系良好 (R2=0.996 ，n=10) ，3 份疫苗 146S 抗原测定回收率分别为93.6% (RSD=2.7% ， n=3) 、102.3% (RSD=2.6% ，n=3) 、95.5% (RSD=5.1% ，n=3) ，方法重复性好、准确性强 (RSD=0.5% ，n=6) ，且操 作简便、高效，对 16 批疫苗的测定结果较理想。应用该方法有望快速高效地检测口蹄疫灭活疫苗的 146S 抗原含 量，为疫苗的质量控制提供有力支持。 : 体积排阻色谱，口蹄疫，灭活疫苗，146S 抗原 Received: October 9, 2017; Accepted: March 26, 2018 Supported by: National Key Research and Development Program of China (No. 2016YFD0501500), Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest (No. 201303046). Corresponding authors: Qizu Zhao. Tel: +86-10 Fax: +86-10 E-mail: zhaoqizu@163.com Songping Zhang. Tel/Fax: +86-