菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA在酵母表达载体中的克隆.pdf

　　　　　　　 Journal of China Pharmaceutical University　2003, 34(1):81～ 84 81 cDNA 1 1 1 2 1 1 刘志斌 , 陈国广 , 李　霜 , 何娉婷 , 韦　萍 , 欧阳平凯 1 2 (, 210009;, 210016) 　　【　】　:克隆菠菜乙醇酸氧化酶 cDNA 并构建其酵母表达载体。 :从新鲜菠菜叶子中提取总 NA, 用 T-PC 法 增菠菜乙醇酸氧化酶编码区cDNA 并插入pMD-T 载体中进行序列测定;将此 cDNA 构建入 P.Pastoris酵母表达体系中的 pPIC3.5k 上的SnaBI/NotI 位点, 进行PC 筛选和限制性酶切鉴定。 :测序表明 获得的基因为乙醇酸氧化酶cDNA 序列, 与国外文献报道的序列相比有约98%的同源性;重组质粒的SnaBI/NotI