DP304）血液组织细胞基因组DNA提取试剂盒操作指南.PDFVIP

（DP304）血液/组织/细胞基 因组DNA提取试剂盒操作指南 ——动物组织 天根生化科技（北京）有限公司 版本号 实验准备 1. 大鼠肝脏10-30 mg 研磨器 2. 移液器及配套无菌枪头（10 μl，200 μl ，1ml），1.5 ml 离心管 3. PBS溶液，无水乙醇 4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机 实验准备-试剂盒准备 使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。 Step 1 加入少量PBS(约50 μl ) ，用组织研磨器打碎处理为细胞悬液 10000 rpm(~11,500 ×g)离心1 min吸去上清，加200 μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。 Step 2 Step 3 加入200 μl缓冲液GB和20 μl 70℃放置10 min，溶液应变清亮， Proteinase K，充分颠倒混匀 简短离心以去除管盖内壁的水珠。 Step 4 加人200 μl 无水乙醇，充分振荡混匀15 sec， 此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除 管盖内壁的水珠。 Step 4 将上一步所得溶液和絮状沉 12,000 rpm(~13,400×g )离心30 sec ，倒掉收 淀都加入一个吸附柱CB3中 集管中的废液,将吸附柱CB3放入收集管中 Step 5 12,000 rpm(~13,400 ×g )离心30 sec ， 倒掉收集管中的废液， 将吸附柱CB3放入收集管中。 向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD Step 6 12,000 rpm(~13,400 ×g )离心30 sec ， 倒掉收集管中的废液， 将吸附柱CB3放入收集管中。 向吸附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW Step 7 重复操作步骤6。 （使用前请先检查是否已加入无水乙醇） Step 8 将吸附柱CB3放回收集管中，12,000 rpm(~13,400 ×g ) 吸附柱CB3室温放置2 min 离心2 min ，倒掉废液。 彻底晾干吸附材料中残余 的漂洗液。 注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。 Step 9 将吸附柱CB3转入1.5 ml离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加50-200 μl 洗脱缓 冲液TE ，室温放置2 min ，12,000 rpm(~13,400×g )离心2 min ，将溶液收集到离 心管中。