乳酸乳球菌摇瓶发酵条件优化.pptVIP

但由于目前产乳链菌肽的菌种产生乳链菌肽产量低、效价不高，利用的培养基价格昂贵，造成生产成本高，导致乳链菌肽不能大规模化生产中的应用。因此，我们开始寻找产高效价、高产量的乳链菌肽生产菌株，并利用工业废料进行发酵生产，以降低成本，推进乳链菌肽在食品、环保、农业、医药、化工等领域的广泛应用。 * 项 目 名 称 ： 乳酸乳球菌摇瓶发酵条件化 项 目 负 责 人 ： 张芳艳 负责人所在学院 ： 化学与生命科学学院 指 导 教 师 ： 滕国生 据估计，全世界每年约有10%一20%的食品由于腐败而废弃，造成巨大的经济损失。过去人们常常利用加入化学防腐剂的方法来延长食品的保 据估计，全世界每年约有10%一20%的食品由于腐败而废弃，造成巨大的经济损失。过去人们常常利用加入化学防腐剂的方法来延长食品的保藏期，由于化学防腐剂添加过量可致癌，对人体健康和生态环境都产生不利的影响。随着人们生活水平的提高，健康食品、绿色食品越来越受到欢迎。利用安全高效生物防腐剂代替化学防腐剂已成为一种趋势。 乳链菌肽(Nisin)是世界上公认安全的防腐剂。是一种由微生物代谢所产生的具有很强杀菌作用的天然代谢产物。乳链菌肽本身具有许多优良性质：首先，容易被人体消化道中的一些蛋白酶和胰蛋白酶所降解，不会在体内蓄积而引起不良反应，并且对食品的色、香、味等无不良影响。使用它还可以降低杀菌温度，减少热处理时间，因此能改进食品的营养价值、风味、结构、颜色等性状，同时还可节省能耗。乳链菌肽本身具有热稳定性．并耐酸、耐低温贮藏，作为一种理想的天然防腐剂获得越来越广泛的应用。在食品工业中，各种食品的防腐保鲜是一个非常重要的问题。 乳链菌肽是由乳酸乳球菌(lactococcus lactis)或乳酸链球菌(Streptococcus lactis)产生的一种小分子多肽抗菌物质，对许多革兰氏阳性菌，包括引起食品腐败和对人体健康有害的葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、微球菌( Micrococcus)、分枝杆菌(Mycobacterium)、利斯特氏菌(Listeria)和乳杆菌(Lactobacillus)等有强烈抑制作用。 乳链菌肽作为一种高效天然无毒的食品防腐剂，己经广泛应用于肉类、鱼类、牛奶、干酪、蛋类、水果、蔬菜、果汁饮料、啤酒酿造、豆制品等食品的防腐处理。随着应用研究的深入，乳链菌肽应用范围目前已扩展到造纸、活性食品包装、农业饲料、生殖避孕、医学移植等领域。它能有效地延长食品变质期和货架寿命,对人体无毒无害,有明显的社会和经济效益。近来还发现乳链菌肽可用于治疗胃和十二指肠溃疡、口腔溃疡和皮肤病 ,具有医药价值,发展前景广阔。 现状 目前国内外对乳链菌肽的研究多集中乳链菌肽的发酵条件优化、单一的菌种选育等研究方面。Angela Faustino Jozala（2005）利用脱脂牛奶对乳链菌肽的发酵培养基进行了优化;Washingtoun state university利用乳清连续发酵乳链菌肽，产量稳定在92.9mg/L；Appl Microbiol Biotechnol (2005)发表了关于乳链菌肽的分批发酵模型。大连轻院焦中高等人以乳酸乳球菌79UV-S22为出发菌株，用紫外线、DES、LiCl 等多种理化因子进行诱变处理，获得一株乳链菌肽高产突变株，其效价稳定在2000 IU/ml 以上；华南理工大学杨博等人对乳酸乳球菌79UV-S22 经多种诱变处理后，利用菌株的乳链菌肽免疫性筛选得到一株乳链菌肽高产菌株，效价达1527 IU/ml；中科院还连栋等人以乳酸乳球菌7962为原始菌株，用紫外线等多种理化诱变剂对其进行诱变处理，获得一株乳链菌肽 高产突变株，其效价稳定在2300-2500 IU/ml。从以上国内外的研究现状来看，菌种的生产效价水平较低、发酵工艺落后、且发酵原材料昂贵、制约了大规模化生产，限制了在食品、保健品和医药等方面的广泛应用。 本项目以购于美国菌种保藏中心Lactococcus lactis subsp.lactis ATCC11454的菌株为出发菌株，对其进行诱变筛选得到遗传稳定的乳链菌肽高产菌株，在对优化乳链菌肽发酵培养基的基础上，我们将采用化学计量学的方法，优化其摇瓶发酵条件，首先采用两水平的PB设计实验，分别考察装液量、接种量、温度、转速、初始pH值和发酵时间对乳链菌肽的影响，采用多元一次回归模型对PB实验结果进行分析，筛选出影响显著摇瓶培养条件，然后进行中心组合设计实验以进一步优化乳链菌肽的摇瓶发酵条件