《DB35T 1276-2012 饲料中三聚氰胺快速检测 酶联免疫吸咐法》.pdf

ICS 65.120 B46 DB35 福 建 省 地 方 标 准 DB35/T 1276—2012 饲料中三聚氰胺快速检测 酶联免疫吸附法 Rapid detection of melamine in the feed Enzyme-linked immunosorbent assay ELISA （ ） 2012 - 07 - 23 发布 2012 - 10 - 20 实施 福建省质量技术监督局 发 布 DB35/T 1276—2012 前 言 本标准根据 GB/T 1.1-2009 给出的规则编写。 本标准由福建省农业厅提出并归口。 本标准主要起草单位：福建蓝昊生物技术有限公司、国家加工食品质量监督检验中心（福州）、福 建出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：李昊、郑小严、陈健、翁惠玲、王天西、林钦、何孟杭、沈晓妙、高小尧、 饶平凡。 I DB35/T 1276—2012 饲料中三聚氰胺快速检测 酶联免疫吸附法 1 范围 本标准规定了饲料中三聚氰胺的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法。 本标准适用于饲料原料、预混合饲料、配合饲料、浓缩饲料中三聚氰胺的测定。 本方法定量测定检出限为 0.01 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 试样中三聚氰胺、酶标三聚氰胺抗原与包被于微量反应板中的三聚氰胺抗体进行免疫竞争反应，加 入酶底物后显色，试样中三聚氰胺含量与颜色深度成反比，用目测法与三聚氰胺标准系列进行半定量检 测，用仪器法进行定量检测。 4 试剂和材料 除非另有规定，所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水或去离子或相当纯度的水。 4.1 三聚氰胺酶联免疫试剂盒中的试剂 4.1.1 包被抗三聚氰胺抗体的聚苯乙烯微量反应板。 4.1.2 样品稀释液（0.01 mol/L pH7.4 磷酸盐缓冲液）：称取 3.628 g磷酸氢二钠（Na HPO ·12HO）、 2 4 2 0.2000 g 磷酸二氢钾（KH PO ）、8.000 g 氯化钠（NaCl）、0.2000 g 氯化钾（KCl），加水溶解，定 2 4 容至 1L。 4.1.3 三聚氰胺标准溶液：准确称取 0.1000 g 三聚氰胺加甲醇溶解，并用甲醇定容至 100