第05章 蛋白质理化性质提取纯化与结构分析测定.pptVIP

第五章 蛋白质提取纯化、理化性质分析与结构测定 第一节 蛋白质理化性质与分析方法 * 本章主要内容： 1.蛋白质理化性质与分析方法； 2.蛋白质提取、纯化与鉴定的一般步骤； 3.重组蛋白提取、纯化与鉴定的注意事项； 4.蛋白质技术； 5.蛋白质结构测定。 一、蛋白质的两性解离和等电点 二、蛋白质的呈色反应 三、蛋白质的紫外吸收 四、蛋白质的分子量 五、蛋白质的胶体性质 六、蛋白质的沉淀 七、蛋白质的变性与复性 当蛋白质溶液处于某一pH值时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，净电荷为“O”，此时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点(isoelectric point, pI)。由于各种蛋白质所含的碱性氨基酸和酸性氨基酸的数目不同，因而有各自的等电点。 蛋白质溶液的pH大于等电点，该蛋白质颗粒带负电荷，反之则带正电荷。 蛋白质分子所带电荷的性质决定了它在电场中移动的方向。处于等电点的蛋白质颗粒，在电场中并不移动。 人体体液中许多蛋白质的等电点在pH5.0左右，所以在体液中以负离子形式存在。 一、蛋白质的两性解离和等电点 二、蛋白质的呈色反应 (一)茚三酮反应(Ninhydrin Reaction) α-氨基酸与水化茚三酮(苯丙环三酮戊烃)作用时，产生蓝色反应。蛋白质是由许多α-氨基酸组成的，故也呈此颜色反应。 (二)双缩脲反应(Biu