微生物工程.菌种及来源.ppt

样品的预处理 目的：提高分离效率 方法： （表2-2含微生物材料的标本预处理方法） 物理方法：热处理；膜过滤法；离心法 化学方法： 1%几丁质；碳酸钙 诱饵法： 石蜡；花粉；蛇皮；头发 选择性分离原理和技术 生长条件的选择与控制原理 控制营养成分 控制培养基酸碱度 添加抑制剂 控制培养温度 控制通气条件 选择性分离技术 富集液体培养技术 固体培养技术 A.富集液体培养 增加混合菌群中所需菌株数量的一种技术 技术特点：给混合菌群提供一些有利于目的菌株生长或不利于目的菌以外的其他菌型生长的条件 培养方式 分批培养方式：以最大比生长速率 （μmax）筛选，存在选择压力的控制、移种时间和次数等问题 连续培养方式：以比生长速率（ μ）筛选 连续富集培养技术分离菌株的优点 分离的菌株特别适合连续发酵生产过程 有利于分离具有某种工业生产特性的菌株 可以筛选出能共生的稳定混合培养物 B. 固体培养技术 常用于分离某些酶产生菌 选择压力：在选择培养基中加入所需酶的基质 课后作业 收集一篇关于发酵行业生产菌种的文献 3、酶抑制剂产生菌的分离 ? 某些酶与病理相关 ? 如果某种化合物能在体外抑制某关键的人体酶， 它就可能在体内有药理作用 ? 选择与生理和病理关系明确的酶作为靶酶 靶 区 靶 酶 抗高血压 血管紧张素转移酶 抗糖尿病 ?-淀粉酶、蔗糖酶等 抗血脂症 缩合酶 抗组氨 组氨酸脱羧酶、组氨-N-甲基转移酶 4、生长因子产生菌的分离 通过观察分离菌能否促进营养缺陷型菌株的生长，来检测生长因子产生菌。 分离培养基上培养 被杀死的菌落周围有无检测菌的生长圈 影印到能支持生长因子产生菌生长的培养基上 Uv照射杀死菌落 铺上一层含相应生长因子缺陷型菌株 第二节 发酵工业中常用微生物 （一） 细菌 1、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) ? 分布广，常存在于枯草、土壤等，一般为腐生菌； ?在酱油、酱类和白酒制曲时，如果水分含量大，温度较高，就容易造成枯草杆菌迅速繁殖；不仅消耗原料蛋白质和淀粉，而且生成刺眼鼻的氨味，造成曲子发粘发臭，使制曲失败。 ? 能产生大量淀粉酶和蛋白酶 AS1.393 蛋白酶 BF7658 ?-淀粉酶 2、大肠杆菌(Escherichia coli) ? 可利用大肠杆菌制取天冬氨酸、苏氨酸、缬氨酸等 ? 大肠杆菌的谷氨酸脱羧酶在工业上被用来进行谷氨酸的定量分析 ? 基因工程的很好材料 3、乳酸杆菌(Lactobacillus sp.) ? 革兰氏阳性，无芽孢，厌氧或兼性厌氧 ? 可生产乳酸 ? 干酪的成熟、乳脂的酸化和腌菜、泡菜制作 4、丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutyleum) ? 芽孢卵形，中生或次端生，使芽孢囊膨大成梭状或鼓槌形 ? 专性厌氧 ? 发酵生产丙酮丁醇 5、肠膜状明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides) ? G+、微需氧至兼性厌氧，生长需要缬氨酸和谷氨酸 ? 在蔗糖液中形成特征性葡聚糖黏液（20~25oC促使形成） ? 可生产葡聚糖 ? 使糖汁变粘而无法加工，为糖厂有害菌 6、醋酸菌 (Acetobacter) ? 不形成芽孢，G－，好气性 ? 分两群：1）只将乙醇氧化成醋酸 2）将产生的醋酸继续氧化成CO2和水 ? 可生产醋酸 7、棒状杆菌 (Corynebacterium) ? 以葡萄糖为原料发酵产生酸，是谷氨酸和其他氨基酸的高产菌 ? 生产谷氨酸等 ? 如北京棒杆菌AS1.299钝齿棒杆菌AS1.542 8、短杆菌 (Brevibacterium) 氨基酸、核苷酸工业生产中常用的菌种，也是酶法合成生产辅酶A的菌种 9、黄单胞菌(Xanthomonas) ? 细胞直杆状，G－，无芽孢，极生鞭毛 ? 在含蔗糖的琼脂平板上形成圆形、边缘整齐、粘稠光滑的黄色菌落；液体培养形成黄色粘稠的胶状物——荚膜多糖，其黄色为一种水溶性色素 ? 野油菜黄单胞菌(X. campestris) 可以淀粉生产黄原胶(Xanthan gum) 10、假单胞菌(Pseudomonas) 能发酵生产维生素B12、丙氨酸、谷氨酸、葡萄糖酸、色素、果胶酶；也能进行类固醇（甾体）转化；有些菌株可利用烃类生产单细胞蛋白。 （二） 放线菌 因其菌落呈放射状而得名 属原核微生物类群，在自然界中分布很广，尤其在有机质丰富的微碱性土壤中较多。 大多腐生，少数寄生。 产生多种抗生素（12 0