凝胶过滤层析法纯化的血红蛋白.pptVIP

* 操作压——流速 50 柱长 75 柱直径 * 操作压——流速 50 柱长 75 柱直径 * 保存：膨胀、半收缩、干燥。 * 操作压——流速 50 柱长 75 柱直径 * 操作压——流速 50 柱长 75 柱直径 * 操作压——流速 50 柱长 75 柱直径 ●加样 在加样时，为了不扰乱凝胶表面，可在顶部放上一层圆形滤纸或尼龙网。样品要有一定的浓度和体积。通常为床柱体积的1%—10%，浓度不宜超过1%~4%。 样品上柱 分析用量：柱床体积的1—2% 制备用量：柱床体积的10—20% 洗脱收集 部分收集器、核酸蛋白检测仪 ●洗脱 洗脱剂：洗脱剂多采用低离子强度的盐溶液。 流速：各种类型凝胶对流速要求不一。由操作压和出水口控制。 ●再生 样品洗脱完毕后，凝胶柱即已再生。一次装柱，可反复使用多次。因此操作简便，重复性高。 ●保存 各型凝胶悬液加防腐剂或灭菌后，可置冰箱保存数月。防腐剂类型很多，最常用的有叠氮化钠0.02%与0.002%洗必泰等，也可用高压蒸汽0.1Mpa 30min灭菌。 三、操作方法 （一）凝胶的选择与处理 1. 凝胶及柱的选择（血红蛋白分子量68000） 选择Sephadex G75和1.5cm×60cm的柱子。 洗脱液为0.1mol/L, pH