气相色谱峰面积和保留时间精密度的重要性-.docVIP

摘要 峰面积和保留时间是气相色谱里的两个主要测量值,他们的精密度最终决定得到定量数据的有效性,这里讨论影响其精密度的主要参数。 前言 支配所有色谱数据的两个测量值是保留时间(t R 和峰面积,精确的t R 值测量是所有现代气相色谱仪的核心保证,增加t R 值的精密度会导致定量分析结果可靠性的提高,并增加了使用自动定量分析的可能,t R 值的精密度的增加还起到使色谱柱效提高(使用细内径毛细管柱和/或缩短分析时间(快速色谱的重要作用。这两个条件具有使单位时间内有更多洗脱物流出的潜在作用。t R 精密度不高会造成定性分析的错误,导致校正数据与错误分析物匹配的总体错误。在气相色谱中(GC ,t R 精密度受到载气流量和柱温精度的双重控制,次要的因素包括自动进样器速度,和“启动分析”信号的精密度。Agilent 6890N 的t R 精密度能够优于0.0008 min (0.048 s,要达到这样测量精密度,在环境条件(实验室温度和压力有少许变化时,会对保留时间精密度有明显的影响,因此,Agilent 6890N 具有环境温度和压力的补偿功能。 气相色谱峰面积和保留时间精密度的重要性技术报告 峰面积的精密度极大地决定定量分析的准确性,它和t R 没有直接关系,但是峰面积的精密度会同样会受到影响t R 变量的影响,为了保持响应值的精密度,控制进入检测器的流量十分重要,检测器温度也对检测器的响应有一定的作用,电子捕获检测器(ECD 或热导检测器(TCD 对温度的敏感性比其他检测器更为厉害。影响峰面积重复性的其他因素是自动进样器吸取试样的精密度、注射速度和注射器的性能。对活性样品整个流路的惰性会极大地影响峰面积的精密度,特别是对低含量样品影响更大。 简而言之,在GC 中t R 和峰面积的精密度受到许多参数的影响,在这些参数中的某些参数的影响大于其他参数。保留时间和峰面积的精密度与高柱效和/或快速色谱相适应,需要把所有的参数(温度、压力和流 量进行严格地控制在允许差的范围之内。 6890N 峰面积和t R的精密度指标 t R精度 Agilent 6890N GC 的t R精密度规定优于0.0008 min 或优于0.008% RSD(相对标准偏差,这里在两个指标之间的“或”字是布尔逻辑关系,它的意思是两个条件之一总是满足的,在多数情况下二者都满足,这些规格指标用表1 中使用的条件进行测定。为了适应这些指标的测定,给仪器通电、通气,让进样口、检测器在规定的温度下保持至少两个小时,色谱柱要老化过并且没有任何残余污染物,在进行测试之前至少立刻进行一次空白分析(不进样。测试这些规格指标,仪器不需要再进行平衡,得到的色谱如图1 所示。正十四烷(2 ng 柱头进样用作t R和峰面积指标测定的物质。 Agilent 6890N GC 带7683N ALS 5-μL 注射器:部件号5181-1273 钳口盖样品瓶:部件号5181-1210 和钳口盖(部件号5181-3375进样口EPC:分流/不分流 不分流模式: 1.0 μL 进样 进样口温度:250 °C 吹扫流量:40.0 mL/min 吹扫时间:0.5 min 恒流量: 6.5 mL/min 气体节省:关闭 载气:氦气 检测器FID 温度:300 oC H2流量:30 mL/min 空气流量:400 mL/min 尾吹气流量:25 mL/min 火焰点燃补偿:15 pA 尾吹气:N2 进样口衬管 Agilent 通用进样口衬管部件号5183-4647 隔垫:部件号5183-4757 柱箱120 V 或240 V 柱箱梯度速率°C/min 柱温°C 保持min 开始–75 0.5 一阶梯度20 190 0.00 总分析时间 6.25 min 平衡时间 1.0 min 色谱柱 Agilent HP-5.625,部件号19091J-413,30 m ×0.32 mm,0.25 μm Agilent 化学工作站(32 位 信号1FID 采集数据速率5 Hz 积分事件表 起始斜率灵敏度:5 起始峰宽:0.02 最小峰面积:5 最小峰高:5 起始肩峰:向下划垂线 分析序列 至少做一次空白分析 样品分析6 次 2 3 图1.测试色谱图 k 是随膜厚(毛细管柱和柱温变化的热力学函数,所以要得到重复性好的t R 值,我们必须控制柱温和线速度,改变膜厚也会影响k 值,但是它的变化常常比较慢,变化是单向的(膜厚逐渐变薄,而且不是我们可以控制的仪器参数(在开始时可以选择色谱柱的膜厚。t R 精密度是峰宽和分离度的函数。t R 的首要用途是峰的鉴定,如果两个峰的t R 变动很大,那就无法正确地 对峰进行鉴定(偏离设定的t R 窗口 ,因而出现太大的偏差。例如在图2 中展示的两个峰,分离度等于1,峰宽相等: 从分离