第二节 红细胞血型及相关检验.pptVIP

质量保证： （1）标本新鲜，应防止污染，且无凝血、溶血。 （2）实验器材应清洁干燥，为防止交叉污染。 （3）认真查对标本与输血申请单上提供的患者姓名、性别、床号、住院号等是否一致。 （4）交叉配血发生溶血或凝集现象，是配血不合的反应，首先应考虑受血者与供血者的ABO和Rh血型鉴定是否有错，须重新鉴定血型，必要时可进行抗体筛检。 （5）如果患者在48h内输入1600～2000ml以上的血液，需要多个供血者，除了患者与供血者需进行交叉配血外，供血者之间也应进行交叉配血，防止供血者之间血型不合。 （6）结果观察要仔细，必要时要用显微镜检查证实。仔细核对配血结果，认真填写报告和登记，准确无误后发出报告。 （7）配血后，受血者和供血者的标本应置冰箱保存。 质量保证： ①本法仅用于检查ABO血型系统IgM血型抗体与抗原是否相配合。 ②宜用试管法进行交叉配血，不能采用玻片法。 本法适用于有输血史和妊娠史，血液中可能产生免疫性抗体的患者使用。有输血史或妊娠史的患者，应抽取48小时内的标本。 ①可选择EDTA-K2抗凝，用血清做试验效果更好。 ②本法对Kell血型系统的抗体检测不理想。 ③凝聚胺只能使正常红细胞发生凝集，对缺乏唾液酸的细胞无作用。 ④主要用于急诊抢救患者的交叉配血。 抗人球蛋白试验 凝聚胺介质法 盐水介质法 方法学评价: 方法 评价 盐水介质法 适用于ABO血型交叉配血，操作简便、快速，不能检出不相配合的IgG类的抗体 抗人球蛋白试验 结果准确，检查不完全抗体最可靠的方法，操作烦琐费时，试剂较贵 凝集胺介质法 应用广泛，快速、灵敏、准确，可检测IgM、IgG抗体，需特殊试剂，操作复杂 发现ABO血型鉴定的错误 临床应用： 1 2 3 发现亚型不合的情况 发现其他的血型抗体或不规则抗体 四、红细胞抗体筛查及鉴定 （一）不规则抗体筛查 标本 待检者血清、2%～5%待检者红细胞生理盐水悬液 试剂 抗体筛选标准红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ） 方法 盐水介质法、凝聚胺法、抗人球蛋白法等 结果判断 血清与自身红细胞和3个筛查红细胞均无凝集者，为不规则抗体筛查阴性； 血清与自身红细胞和3个筛查红细胞均凝集者，待检者血清中存在自身冷抗体或同种免疫性红细胞不规则抗体； 血清与自身红细胞无凝集，与3个筛查红细胞至少有1个出现凝集，为不规则抗体筛查阳性，表明待检者血清中含同种免疫性红细胞不规则抗体 待检者血清 + 谱红细胞 红细胞凝集反应 四、红细胞抗体筛查及鉴定 （二）不规则抗体鉴定 五、血型鉴定和交叉配血自动分析 自动化血型分析技术可应用于：①ABO血型鉴定。②Rh血型鉴定。③交叉配血。④抗体筛选。⑤抗体鉴别。 1．U型微孔板法 为96孔U型PVC板，在中心血站进行献血员大批量的ABO血型鉴定时，与全自动加样仪器、酶标仪联合使用。 五、血型鉴定和交叉配血自动分析 2．V型梯度微孔板 未凝集红细胞沉降后从V型梯度微孔板孔中的梯度上滚落到孔底部，凝集红细胞沉降后挂在V型梯度微孔板孔中的梯度上，通过摄影技术自动判断结果。 五、血型鉴定和交叉配血自动分析 3．血型定型试剂卡法 主要应用于大型医院输血科进行交叉配血及血型鉴定等。 六、吸收放散试验 抗体与相应抗原在适合条件下可发生凝集或致敏，但这种结合是可逆的，如改变某些物理或化学条件，抗体可以从结合的红细胞上解离下来，此种试验方法称为吸收放散试验。 （一）吸收试验 冷抗体与相应抗原在4℃反应最强，常用冷吸收试验。温抗体与相应抗原在37℃反应最强，常用温抗体吸收试验。 （二）放散试验 一般ABO抗体首选热放散方法；Rh抗体首选乙醚放散方法。 鉴定抗体特异性 鉴定溶血性疾病抗体 浓缩低效价抗体 证实红细胞上的弱抗原 去除血清中的抗体 分离、鉴定混合抗体 吸收放散试验的临床应用： * 职业教育医学检验技术专业教学资源库 第二节 红细胞血型及相关检验 一、ABO血型鉴定 （一）盐水介质试管法 1．原理 红细胞表面的A、B抗原与相应的IgM型抗A、抗B抗体在盐水介质中发生特异性结合，可出现肉眼可见的凝集。 一、ABO血型鉴定 （一）盐水介质试管法 2．试剂 人血清ABO血型抗体 (1)标准血清 人ABO血型单克隆抗体 标准血清 灭菌 冷凝集素及稳定性 补体 亲和力 特异性 抗体效价 标准血清的要求： 一、ABO血型鉴定 （一）盐水介质试管法 2．试剂 (2)标准红细胞悬液 3个以上的健康人血液，按A、B、O型分别混合后，经生理盐水洗涤3次，用压积红细胞配成2%～5%红细胞悬液。 一、ABO血型鉴定 （一）盐水介质试管法 3．