七章酸度的测定讲课资料.pptVIP

第七章 酸度的测定;主要内容;酸度的概念;;有机酸的来源与分布;酸度测定的意义;酸度的测定;总酸度的测定;测定过程; 取预处理好的样品，加入指示剂，然后用NaOH滴定。;有效酸度测定;样品预处理;pH法;比色法;挥发酸的测定;水蒸汽蒸馏;原理: 样品经处理后，加适量磷酸使结合态挥发酸游离出来，用水蒸汽蒸馏分离出总挥发酸，经冷凝，收集后，以酚酞作为指示剂，用标准碱滴定至微红色30s不退为终点，根据标准碱消耗量计算出样品中总挥发酸含量。 ; 1）无CO2饮料: 直接取样 2）含 CO2饮料: 除去 CO2, 取样 3）固体样品: 样品—磨碎－加无CO2去离子水－混合均匀－取样 注意： 1）添加H3PO4 2）仪器安装及其操作 ;食品中有机酸的测定;薄板制作： 选择不同硅胶、CMC－Na等材料，加入去离子水研磨，铺板，活化（120℃烘干2h），备用。 上样分离： 点样，并选择合适的流动相，进行分离 计算： 计算Rf。 可以网站观看整个实验过程 ;气相色谱法（GC）;液相色谱法（HPLC）;（1）紫外检测器 　　该检测器适用于对紫外光（或可见光）有吸收性能样品的检测。其特点：使用面广（如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）；灵敏度高（检测下限为10-10g／ml）；线性范围宽；对温度和流速变化不敏感；可检测梯度溶液洗脱的样品。 （2）示差折光检测器 　　凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。目前，糖类化合物的检测大多使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单，但灵敏度低（检测下限为10-7g／ml），流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。 （3）荧光检测器 　　凡具有荧光的物质，在一定条件下，其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此，这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物（如多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等）的测定，其灵敏度很高（检测下限为10-12～10-14g／ml），痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。 ;色谱法 色谱法（又称层析法）根据其分离原理可分为：吸附色谱、分配色谱、离??交换色谱与排阻色谱等。 吸附色谱法是利用被分离物质在吸附剂上吸附能力的不同，用溶剂或气体洗脱使组分分离；常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。 分配色谱是利用被分离物质在两相中分配系数的不同使组分分离；其中一相被涂布或键合在固体载体上，称为固定相,另一相为液体或气体,称为流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。 离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上交换能力的不同使组分分离；常用的有不同强度的阳离子交换树脂，阴离子交换树脂，流动相为水或含有机溶剂的缓冲液。 分子排阻色谱法又称凝胶色谱法，是利用被分离物质分子大小的不同导致在填料上渗透程度不同使组分分离；常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等，根据固定相和供试品的性质选用水或有机溶剂作为流动相。 ; 色谱法又可根据分离方法分为：纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。 所用溶剂应与供试品不起化学反应,纯度要求较高。 分析时的温度,除气相色谱法或另有规定外，系指在室温操作。 分离后各成分的检出，应采用各品种项下所规定的方法。 1）采用纸色谱法、薄层色谱法或柱色谱法分离有色物质时，可根据其色带进行区分； 2）分离无色物质时，可在短波(254nm)或长波(365nm)紫外光灯下检视，其中纸色谱或薄层色谱也可喷以显色剂使之显色，或在薄层色谱中用加有荧光物质的薄层硅胶，采用荧光猝灭法检视。 3）柱色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法可用接于色谱柱出口处的各种检测器检测。 4）柱色谱法还可分部收集流出液后用适宜方法测定。 ;离子交换色谱;谢谢