RNA5063p调控UHRF1抑制大肠癌细胞转移的机制.pdfVIP

第４０卷第３期 同济大学学报 （医学版 ） Ｖｏｌ４０ Ｎｏ３ ２０１９年６月 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＯＮＧＪＩ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥ） Ｊｕｎ． ２０１９ ｄｏｉ：１０１６１１８／ｊ１００８ ０３９２２０１９０３００７ ·基础研究· 微小ＲＮＡ⁃５０６⁃３ｐ调控ＵＨＲＦ１抑制 大肠癌细胞转移的机制 １ ２ １ １ １ 蒋　 逊 ， 肖天卫 ，鲁贺磊 ，刘忠臣 ，王　 峰 （１． 同济大学附属第十人民医院胃肠外科，上海　 ２０００７２；２． 云南省临沧市双江县人民医院普外科，云南 临沧　 ６７７３００） 【摘要】 目的　 探讨微小ＲＮＡ⁃５０６⁃３ｐ（ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ）通过调控含ＰＨＤ及指环结构域的类泛素蛋白１（ＵＨＲＦ１）的表 达，进而影响大肠癌细胞转移能力的机制。 方法　 利用生物信息学的方法预测并筛选ＵＨＲＦ１上游可能发挥调控 作用的ｍｉＲＮＡ⁃５０６⁃３ｐ；在大肠癌细胞及组织中分别检测ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ及ＵＨＲＦ１的表达水平并分析其相关性；运用 荧光素酶报告基因技术检测ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ与ＵＨＲＦ１３′非翻译区（３′ＵＴＲ）特异性结合的情况；荧光定量ＰＣＲ（ｑＲＴ⁃ ＰＣＲ）及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测大肠癌细胞转染ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ类似物（ｍｉｍｉｃｓ）后对ＵＨＲＦ１表达水平的影响；构建ＵＨＲＦ１ 过表达的大肠癌稳转细胞株，分别转染ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ ｍｉｍｉｃｓ及其对照序列（ｍｉｍｉｃｓ ｃｏｎｔｒｏｌ）后，利用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ 实验 检测处理前后大肠癌细胞转移能力的变化。 结果　 相对于正常大肠上皮细胞及癌旁组织而言，ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ在大肠 ＝－ ＝ 癌细胞及组织中的表达均下调（均Ｐ＜００５），且与ＵＨＲＦ１的表达水平呈负相关（ｒ ０４５６，Ｐ ００４４）；ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ 通过其“种子序列”与ＵＨＲＦ１３′ＵＴＲ特异性结合（Ｐ＜００１），并减少了ＵＨＲＦ１的ｍＲＮＡ及蛋白表达（均Ｐ＜００１）； 转染ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ ｍｉｍｉｃｓ抑制了大肠癌ＬｏＶｏ 细胞的转移能力（Ｐ＜００１），而在此基础上增加ＵＨＲＦ１的表达则逆转 了ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ 的抑制作用（Ｐ＜００１）。 结论　 ｍｉＲ⁃５０６⁃３ｐ通过调控ＵＨＲＦ１抑制了大肠癌细胞的转移能力，在大肠 癌中发挥抑癌基因的作用。 【关键词】大肠癌；转移；ｍｉｃｒｏＲＮＡ⁃５０６⁃３ｐ；含ＰＨＤ及指环结构域的类泛素蛋白１ 【中图分类号】 ＋ 【文献标志码】 【文章编号】 Ｒ７３５３ ４　 Ａ　 １００８ ０３９２（２０１９）０３ ０２９８ ０７ ＭｉＲ⁃５０６⁃３ｐ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｂｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＵＨＲＦ１ １ ２ １ １ １ ＪＩＡＮＧＸｕｎ ，ＸＩＡＯ Ｔｉａｎ⁃ｗｅｉ ，ＬＵＨｅ⁃ｌｅｉ ，ＬＩＵＺｈｏｎｇ⁃ｃｈｅｎ ，ＷＡＮＧＦｅｎｇ （１． Ｄｅｐｔ． ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｔｅｎｔｈ ＰｅｏｐｌｅｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｇｊｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００７２，Ｃｈｉｎａ； ２