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掌握植物组织培养的基本过程 了解影响植物组织培养的各种因素 掌握培养基制备、外植体消毒、接种、培养、移栽以及栽培等基本操作技术 教学目标: 课题 :组织培养 切取 形成层 无菌接种 诱导愈伤组织 的形成 形成试管苗 培养室中培养 移栽 脱分化 再分化 排列疏松无规则、 高度液泡化、 无定形状态、 薄壁细胞 一、植物的组织培养的基本过程 whez liling 原理: 植物细胞的全能性 二、影响植物组织培养的因素 (1)植物材料的选择 菊花 胡萝卜 枸杞 形成层 1.植物种类 2.取材部位 二、影响植物组织培养的因素 (1)植物材料的选择 2013.5.28晚9:00采集 2013.5.29早7:00采集 3.器官年龄 4.保存时间 二、影响植物组织培养的因素 (1)植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的部位、年龄、保存时间的长短会影响实验结果 不同植物的组织培养难度不同—— (2)营养条件—— MS培养基主要成分包括: A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等 C、有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、 蔗糖等 ①常用的植物激素: (3)植物激素的影响 生长素、细胞分裂素和赤霉素 ②生长素和细胞分裂素对实验的影响 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂,但细胞不分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 ③生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响 (4)pH、温度、光照等 生长素/细胞分裂素比值 结果 比值高时 促根分化,抑芽形成 比值低时 促芽分化,抑根形成 比值适中 促进愈伤组织生长 (5)无菌技术 三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖 制备培养基 外植体消毒 接种 培养 移栽和栽培 选取外植体 制备培养基 选取外植体并消毒 接种 培养 移栽和栽培 三、尝试通过组织培养进行菊花的大量繁殖 (二)选取外植体并消毒 阅读教材P34,思考下列问题: 1、什么是外植体?如何选择? 2、用哪些方法对外植体消毒? 3、如何避免已经消毒的外植体被再次污染? 选取菊花茎段时,要取生长旺盛的 ; 外植体消毒流程图: 嫩枝 无菌水清洗3次 冲洗外植体 刷洗,冲洗20分钟左右 无菌吸水纸吸干表面水分 放入70% 酒精 摇动2-3次6-7秒 无菌水清洗并吸干表面水分 放入 氯化汞 溶液浸泡1~2分钟 流水 洗衣粉 (三)接种 1.无菌技术主要包括哪几个方面? 1.技术范围: (1)实验操作空间清洁和消毒 操作者的手、衣着消毒 (2)实验中培养器皿、接种用 具和培养基等灭菌 (3)实验操作过程 无菌技术: 防止外来杂菌的污染 酒精灯火焰旁操作 超净工作台 (4)实验中应避免已经灭菌处理的 材料用具与周围的物品相接触 请比较以下两组图片,找出不同之处,并做分析。 (三)接种 1.无菌技术主要包括哪几个方面? 1 4 3 2 D A B C * *
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