raicummiliaceum）叶绿体光系统发育及psbA基因转录.pdfVIP

遗 传 学 报，24(5):464-470,1997 ActaGenedcaSinica raicum miliaceum） 不同光质对黍子 P（a 叶绿体光系统发育及psbA基因转录 物稳态含量的影响 马建，}t （中国农业科学院生物技术研究中心 北京 100081) 娄世庆 匡廷云 黎 家 童 哲 汤佩松 （中国科学院植物研究所 北京 100093) 摘要 本文以一种C4植物— 黍子 P（anicummiliaceum)为材料，在白光、红光、蓝光、远红光 和黑暗5种不同条件下培养黍子幼苗，叶片采收后用于叶绿素积累、叶绿体吸收光谱、叶绿体 低温荧光发射光谱和高分子量cpRNA积累的测定以及psbA基因的NorthernBlot分析。结果 表明：白光、红光和蓝光下生长的黍子，它们的叶绿体都有功能完善的光合系统；而远红光下 生长的黍子，已有光系统II的发射峰，只是强度和波长都与白光、红光和蓝光下的有所不同； 不同光质促进叶绿素积累和高分子量cpRNA积累的效率是平行的，其中红光较蓝光和远红光 有效，而复合光 （白光）的作用效果最好。当以白光诱导的积累量为100％时，可以分别求出不 同光质诱导叶绿素积累和高分子量cpRNA积累的相对量，结果表明，高分子量cpRNA的积累 对光的依赖性要比叶绿素积累对光的依赖性大得多。psbA基因的NorthernBlot分析表明，不 同光质下psbA转录物的积累与高分子量cpRNA的积累是一致的。据此我们推测，在黍子叶 绿体的光诱导发育过程中，psbA的转录过程可能不受光信号的直接调控，而是受叶绿体整体 发育状态的控制。 关键词 黍子 P（anicummiliaceum)，光质，叶绿体发育，psbA基因 叶绿体光系统11反应中心32kDa蛋白的编码基因是第一个被分离鉴定的光系统II多 肤的编码基因，因此，它被定名为psbA。早期的研究表明，psbA的mRNA积累需要光的诱 导。据此，psbA曾被称为光基因324[1。在芥、豌豆[12［1和玉米等植物中，psbA的mRNA积累 的确受光的诱导，但在绿豆[12［1和大麦9[1［等植物中，psbA的mRNA在黄化苗中即已存在较大 的量，照光后只是稍有增加而已。尽管有人认为，psbA的转录受光敏色素的调控[12［1，而且 更有人推测psbA中存在光应答元件(L（RE)[101，但都缺少直接的证明。现在的大多数研究 者都倾向于psbA转录的非光调节观点，认为psbA与叶绿体中的其他基因一样，都是组成 型转录的[71。事实上，在成熟的匆irodela的叶绿体中，光暗交替对psbA的mRNA含量影 本文于1996-01-23收到，1996-05-03修回 马建忠等：不同光质对黍子 P（anicummiliaceum）叶绿体光系统发育 5期 助sbA基因转录物稳态含量的影响 465 响不大，但却对32kDa蛋白的含量有十分显著的影响[6［1。黑暗中生长的大麦，其黄化质体 含有psbA的mRNA却不含有D1蛋白，光诱导转绿时，D1蛋白才被迅速合成9[l［。为深人了 解光影响psbA基因表达的分子机制，我们将不同光质诱导黄化质体发育与诱导psbA基因 转录的效应进行了比较研究，期望通过这一比较研究深人了解psbA基因表达调节的内在 控制方式。 1 材料和方法 1.1 材料 本实验所使用的植物材料— 黍子 P（anicummiliacea)由山西省农科院生物Z程室 吴树彪先生赠送，品种为雁黍1号。所使用的宿主细菌为EscherichiacoliHB101。探针 为构建在pBR322中的水稻psbA基因 （由吴乃虎先生提供）。工具酶.NC膜及地高辛非放 射性标记检测试剂盒均购自BoehringerMannheimChinaLtd. 1.2 方法 1.2.1 植物材料的培养 将黍子干播于湿沙盘中，用自来水浇灌，在室温(250C）和日光 灯 4（焦耳 ／米2·秒）、红光 6（60