固相析出分离技术应用.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2．有机溶剂结晶法 此法较常用于一些小分子物质的结晶。 例如，用一些低极性溶剂提取固醇类时，酶类常被皂化生成水溶性脂肪酸钠盐和甘油，固醇类存在于中性不皂化部分。此时再用有机溶剂把固醇抽提于甲醇或丙酮中，浓缩后很快形成白色鳞片状结晶析出。某些蛋白质也可以在稀的有机溶剂中进行结晶，但常保持比较低的温度以防止蛋白质变性。 （1）直接加有机溶剂结晶的方法 （2）利用挥发性溶剂蒸发结晶方法 3．等电点结晶法 等电点结晶法多用于一些两性物质。 4．其他 主要有温度差法、加入金属离子法等。 （1）温度差法： 例如，葡萄糖-1-磷酸钠盐的重结晶：葡萄糖-1-磷酸钠盐的粗结晶溶于20倍体积的0.05 mol/L盐酸中，过滤除去不溶物。清液在80℃水浴中加热到60 - 65℃，后用1mol/L氢氧化钠调pH至7.0，趁热过滤除去无机盐沉淀。清液在4℃冰箱中放置24 h，得葡萄糖-1-磷酸钠盐的片状结晶。 （2）加入金属离子法 例如，铁蛋白的结晶：狗肝的水抽提液加硫酸铵至50％饱和度，沉淀后将沉淀再溶于少量蒸馏水中。每100 mL溶液缓慢加入5g固体硫酸镉，冰箱放置过夜，得红褐色菱形含镉的铁蛋白结晶。 五、结晶操作 结晶操作的方法有：分批操作和连续操作两种。 我国发酵产品的结晶过程目前仍以分批操作为主