基因表达转录以及翻译.ppt

Cytochrome C只有与血红素（heme）相结合才有功能 Acetyl-CoA羧化酶常与Biotin分子相结合 辅基连接（Prosthetic Groups） III.翻译后加工与修饰 小结 * * * * * * * * * * * * * * * 氨基酰tRNA合成酶（Aminoacyl-tRNA Synthetase） 对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性 具校正活性（Proofreading Activity） 具水解错配氨基酸的磷酸酯键活性 氨基酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet II.翻译过程 在氨基酰tRNA合成酶催化下,利用ATP,在氨基酸羧基上进行活化,形成氨基酰-AMP,再与氨基酰tRNA合成酶结合形成三联复合物 II.翻译过程 II.翻译过程 原核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 真核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 甲酰甲硫氨酸 fMet-tRNAfMet 甲硫氨酸 Met-tRNAMet 原核细胞中起始氨基酸活化后，还要甲酰化，形成甲酰蛋氨酸tRNA（fMet-tRNAfMet），由N10甲酰四氢叶酸提供甲酰基 而真核细胞没有此过程 起始氨基酸的活化 II.翻译过程 核糖体与mRNA结合并与氨基酰-tRNA生成起始复合物 翻译的起始 II.翻译过程 原核生物翻译起始 核糖体大小亚基分离 mRNA在小亚基定位结合 起始氨基酰-tRNA的结合 核糖体大亚基结合 II.翻译过程 (翻译起始复合物形成)又可被分成4步： 要求： 需要特异的起始tRNA即Met-tRNAiMet，并且不需要N端甲酰化。已发现的真核起始因子有近10种（eIF） 起始复合物形成于mRNA5’端AUG上游的帽子结构（除某些病毒mRNA外） ATP水解为ADP供给mRNA结合所需要的能量 真核细胞蛋白质合成的起始 II.翻译过程 核蛋白体大小亚基分离： 翻译起始是由eIF-3结合在40S小亚基上而促进80S核糖体解离出60S大亚基开始的 起始氨基酰-tRNA结合： 同时Met-tRNAiMet 在eIF-2作用下，与GTP结合，再通过eIF-3的作用，先结合到40S小亚基，然后再与mRNA结合 mRNA在核蛋白体小亚基就位： mRNA结合到40S小亚基需要eIF-1e、 eIF-3、IF-4A、eIF-4B及eIF-4C并需ATP 结合过程：a）通过帽结合蛋白与 mRNA的帽结合，转移至小亚基；b）mRNA在小亚基上向下游移动，使起始密码AUG在tRNAimet的反密码位置结合，开始翻译 核蛋白体大亚基结合： eIF-5帮助结合Met-tRNAiMet ·GTP及mRNA的40S小亚基与60S大亚基结合，形成80S复合物。eIF-5具GTP酶活性，水解GTP并促使其它起始因子从40S小亚基表面脱落，而有利于40S与60S两个亚基结合起来成为具有活性的80S-Met-tRNAiMet-mRNA起始复合物 真核生物翻译起始复合物形成 II.翻译过程 核糖体沿mRNA5’端向3’端移动，导致从N端向C端的多肽合成。肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括：AA-tRNA与核糖体结合、肽键的生成和移位 延伸因子（Elongation Factor, EF）： 原核生物：EF-T（EF-Tu, EF-Ts)、 EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 肽链的延长 II.翻译过程 进位：为密码子所特定的氨基酰tRNA结合到核蛋白体的A位， 氨基酰tRNA在进位前需要有三种延长因子的作用，即热不稳定EF-Tu,热稳定EF-Ts及依赖GTP的转位因子 EF-Tu首先与GTP结合，然后再与氨基酰tRNA结合成三元复合物（AA-tRNA-Tu-GTP）后才能进入A位 此时GTP水解成GDP，EF-Tu和GDP与结合在A位上的氨基酰tRNA分离 II.翻译过程 转肽--肽键的形成： 在70S起始复合物形成过程中，核糖核蛋白体的P位上已结合了起始型甲酰蛋氨酸tRNA 进位后，P位和A位上各结合一个氨基酰tRNA 两个氨基酸之间在核糖体转肽酶（Transpeptidase）作用下，P位上的氨基酸提供α-COOH基，与A位上的氨基酸的α-NH2形成肽键，从而使P位上的氨基酸连接到A位氨基酸的氨基上，这就是转肽 转肽后，在A位上形成一个二肽酰tRNA 翻译延伸过程 II.翻译过程 移位（Translocation）： 转肽作用发生后，氨基酸都位于A位 P位上无负荷氨基酸的tRNA就此脱落，核蛋白体沿着mR