抑制心肌特异性Dicer基因缺失小鼠心脏病理性重构.pdfVIP

　ｈｔｔｐ：／／ａａｍｍｔ．ｔｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　　 　　　　　　第三军医大学学报，２０１７，３９（１４） １４６９ ＤＯＩ：１０．１６０１６／ｊ．１０００５４０４．２０１６１１０３０ ｍｉｃｒｏＲＮＡ１抑制心肌特异性Ｄｉｃｅｒ基因缺失小鼠心脏病理性重构 １ １ ２ １ １ 罗水莲 ，陈宇航 ，石毓君 ，苏　立 　　（４０００１４重庆，重庆医科大学附属第二医院心内科 ；６１００４１成都，四川大 ２ 学华西医院病理研究室 ） 　　［摘要］　目的　探讨 ｍｉｃｒｏＲＮＡ１（ｍｉＲ１）对他莫昔芬（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ，ＴＭＸ）诱导的心肌特异性 Ｄｉｃｅｒ ｌｏｘｐ／ｌｏｘｐ 基因缺失小鼠心脏结构重构及心功能的影响。方法　采用Ｍｙｈ６Ｃｒｅ／Ｌｏｘｐ重组系统，通过Ｄｉｃｅｒ 小 ｌｏｘｐ／ｌｏｘｐ 鼠和Ｍｙｈ６ｃｒｅＥＲＴ小鼠杂交，获得 Ｍｙｈ６ｃｒｅＥＲＴ／Ｄｉｃｅｒ 小鼠。将 １８只８周龄雄性 Ｍｙｈ６ｃｒｅＥＲＴ／ ｌｏｘｐ／ｌｏｘｐ Ｄｉｃｅｒ 小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、ｍｉＲ１治疗组。采用腹腔注射２０ｍｇ／ｍＬＴＭＸ溶 液（０．１ｍＬ），连续注射５ｄ，建立心肌特异性 Ｄｉｃｅｒ基因缺失心力衰竭小鼠模型，对照组腹腔注射玉米 油；模型建立后，ｍｉＲ１治疗组通过尾静脉注射ｍｉＲ１类似物（ｍｉＲ１ｍｉｍｉｃ）１０ｎｍｏｌ／只，对照组给予同 等剂量生理盐水，模型组给予ｍｉＲＮＡ阴性对照试剂，２次／周。１周后，经胸二维超声心动图检测各组小 鼠舒张末期左室内径（ＬＶＩＤｄ）、收缩末期左室内径（ＬＶＩＤｓ）、舒张末期左室容积（ＥＤＶ）、收缩末期左室 容积（ＥＳＶ）、射血分数（ＥＦ）及左室短轴缩短率（ＦＳ），然后收集心肌标本，通过ＨＥ染色、Ｍａｓｓｏｎ三色染 色及天狼猩红染色观察小鼠心肌结构重构程度；利用原位缺口末端标记法（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｍｅｄｉａｔｅｄｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ，ＴＵＮＥＬ）免疫荧光染色检测心肌组织细胞凋亡情况；通过细 胞增殖指标Ｋｉ６７免疫组化染色评估细胞增殖水平。结果　建模后 １周，模型组小鼠心功能明显下降， ＬＶＩＤｓ及ＥＳＶ均高于对照组（Ｐ＜００５），ＥＦ及ＦＳ则显著低于对照组（Ｐ＜００５），ｍｉＲ１治疗后上述指 标均较模型组明显改善（Ｐ＜００５）。组织病理学检测结果显示，与对照组相比，模型组小鼠心肌细胞 排列紊乱，细胞肥大，炎症细胞浸润明显，心肌纤维化显著，而治疗组小鼠心肌细胞形态正常，无明显 肥大和炎性浸润，未见明显的间质纤维化；ＴＵＮＥＬ免疫荧光染色及 Ｋｉ６７免疫组化染色结果显示， ｍｉＲ１治疗组小鼠较模型组心肌组织凋亡比例增加（Ｐ＜００５），且存在较明显的细胞增殖（Ｐ＜ ００５）。结论　ｍｉＲ１可抑制ＴＭＸ诱导的心肌特异性Ｄｉｃｅｒ基因缺失心力衰竭模型中心肌细胞的固有 改变和间质的改变，抑制心脏结构重构，维持心功能。 　　［关键词］　Ｄｉｃｅｒ，心力衰竭；ｍｉｃｒｏＲＮＡ１；心脏重构 　　［中图法分类号］　Ｒ３２２．１１；Ｒ３９４．１；Ｒ５４１．６ ［文献标志码］　Ａ ＭｉｃｒｏＲＮＡ１ｐｒｅｖｅｎｔｓｃａｒｄｉａｃｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｉｎｍｉｃｅｗｉｔｈｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙ Ｄｉｃｅｒａｂｌａｔｉｏｎ １ １ ２ １ １ ＬＵＯＳｈｕｉｌｉａｎ，ＣＨＥＮＹｕｈａｎｇ，ＳＨＩＹｕｊｕｎ，ＳＵＬｉ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣａｒｄｉｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆ