应用分支DNA技术及SqRT_PCR方法检测结直肠癌患者腹腔冲洗液中游离癌细胞.docVIP

应用分支DNA技术及SqRT_PCR方法检测结直肠癌患者腹腔冲洗液中游离癌细胞.doc

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【文章编号】1007-9424(201002-0165-05论著应用分支DNA技术及SqR T2PCR方法检测 结直肠癌患者腹腔冲洗液中游离癌细胞△ 王浩斌1,王崇树1,张才全2,谢贤雍3 【摘要】 目的 探讨分支DNA(b2DNA及半定量R T2PCR(SqR T2PCR在结直肠癌术中腹腔冲洗液中游离癌细胞检测中的应用。方法 分别采用基于b2DNA信号放大的基因表达定量检测技术及SqR T2PCR方法检测48例结直肠癌患者术中腹腔冲洗液中CEA mRNA的表达,同时行腹腔冲洗液细胞学检查(peritoneal lavage cytolo2 gy,PL C,收集12例结直肠良性病变患者的腹腔冲洗液为阴性对照,GA PD H mRNA为内参对照。结果 b2DNA技术和SqRT2PCR方法检测游离癌细胞的阳性率(43.8%,31.3%较PL C的检出率(4.2%高(P0.01。 结直肠癌患者腹腔冲洗液中CEA mRNA的相对表达量均与肿瘤分化程度、浆膜侵犯程度和Dukes分期有关(P 0.05,而与肿瘤大小、患者性别、年龄无关(P0.05。结论 b2DNA技术和SqR T2PCR方法检测游离癌细胞各有 优缺点;腹腔内游离癌细胞的存在与结直肠癌临床病理因素有关。 【关键词】 结直肠肿瘤;肿瘤微转移;分支DNA;半定量反转录2聚合酶链反应;癌胚抗原 【中图分类号】R735.34;R73237   【文献标识码】A Detecting Free C ancer C ells in Peritoneal C avity of Colorectal C ancer P atients by B ranched2Chain DNA and SqRT2PCR W A N G H ao2bin1,W A N G C hong2shu1,Z HA N G C ai2quan2,X I E X ian2yong3. 1.T he Fi rst Department of General S urgery,T he A f f iliated Hos pital of N orth S ichuan Medical College,N anchong637000,S ichuan Province, China; 2.T he T hi rd Department of General S urgery,T he Fi rst A f f iliated Hos pital,Chongqing Universit y of Medical Sciences,Chongqing400016,China; 3.De partment of Pat hology,T he A f f iliated Hos pital of N orth S ichuan Medical College,N anchong637000,S ichuan Province,China Corres ponding A uthor:W A N G C hong2shu,E2mail:chongs2w ang@163.com 【Abstract】 Objective To evaluate branched2chain DNA(b2DNAsignal amplification and semi2quantitative (SqR T2PCR in detection of f ree cancer cells in peritoneal flushing fluid of colorectal cancer patients during surger2 y.Methods The CEA mRNA in peritoneal flushing fluid in48cases of colorectal cancer were detected by b2DNA and SqRT2PCR.Peritoneal flushing fluid cytology(PL Cwas conformed simultaneously to detect the f ree cancer cells.The peritoneal flushing fluid of12cases with colorectal benign disease were taken as negative control,G APDH mRNA as internal control.R esults In colorectal cancer patients,positive rate of f ree cancer cells by b2DNA and SqR T2PCR(43.8%,31.3%was hig

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