生物分子LB膜表面结构与物化性质的原子力显微镜分析.docVIP

研究报告 生命科学仪器　　２００８　第６卷／　３月刊 生物分子ＬＢ膜表面结构与物化性质的原子力显微镜分析 朱　杰，　王国栋 西北农林科技大学理学院　杨凌　７１２１００ 摘要ＬＢ膜以其广泛的应用价值而备受关注，而其各种性质的表征是推动其应用的源动力，原子力显微镜以其优秀 的时空分辨能力、力学操纵能力而在众多表面表征技术中显得尤为突出。文章在详细介绍原子力显微镜基本探测原理的基础上，全面总结了原子力显微镜技术在ＬＢ膜参量，如表面精细结构、静电荷分布、磁畴分布、膜分子间相互作用等分析中的应用，并探讨了该技术在膜表面表征中存在的技术问题，对膜参量表征技术的发展和应用前景进行了展望。关键词原子力显微镜；　ＬＢ膜；表面结构；物化性质中图分类号：Ｏ３４２．１　Ｑ７５３．２　　　　文章识别号：Ａ 引言 单层厚度在零点几纳米至几纳米的ＬＢ膜（Ｌａｎｇｍｕｉｒ－Ｂｌｏｄｇｅｔｔ　Ｆｉｌｍ）具有高度各向异性的层状结构且在理论上几乎没有缺陷；运用ＬＢ技术还可实现单一物质和多种物质在ＬＢ膜上的可控性分子组装，形成具有特殊性能的分子有序体［１，２］。这些特点是其他技术所无法比拟的，通过分子组装可对生物膜进行模拟，研究成膜分子间的相互作用，进而了解生物膜的结构与功能；将ＬＢ膜作为实验载体，可对其他生物大分子的性能进行研究；利用ＬＢ技术还可对药物制剂进行包裹，从而在方剂化学和生物医学工程中大有作为；通过功能分子的组装亦可开发出多种生物功能器件，以满足工程上的需求；另外，ＬＢ膜还可广泛地应用于环境工程、电子器件研发等研究领域。如此广泛的应用范围与发展前景使得ＬＢ技术深受科技界的关注［４］。随着膜技术的蓬勃发展，人们力图通过控制膜 ［３］ 技术在科技研究中的应用，取得了良好的社会效益。 １ＡＦＭ的工作模式及特点 的表面形态结构，改进制膜的方法，进而提高膜的性能。近年发展起来的原子力显微镜（ａｔｏｍｉｃ　ｆｏｒｃｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ＡＦＭ）可观察分子膜中分子的排列结构、取向及分子链的空间构象，研究分子膜的聚合、晶畴形成、相变、衰变等动态过程，还能在测量分子膜表面在原子水平上的各种物理性质［５］。不仅如此，还可用ＡＦＭ探针对分子组装体进行纳米级的刻蚀、表面微区改性。ＡＦＭ的深入研究使人们对ＬＢ膜的表面微观结构和物理性质有了更全面的理解，极大地推进了ＬＢ膜 ＡＦＭ是用一端固定而另一端装有纳米级针尖的弹 性微悬臂来检测样品表面形貌的。当样品在针尖下面扫描时，同距离密切相关的针尖－样品相互作用就会引起微悬臂的形变。也就是说，微悬臂的形变是对样品－针尖相互作用及样品表面形貌的直接反映［６］。探针和样品间的力－距离关系是本仪器测量的关键点。根据初始工作距离的不同可将ＡＦＭ的工作模式分为三大类型：接触模式（Ｃｏｎｔａｃｔ　Ｍｏｄｅ，ＣＭ－ＡＦＭ）、非接触模式（Ｎｏｎ－ｃｏｎｔａｃｔ　Ｍｏｄｅ，ＮＣＭ－ＡＦＭ）和轻敲模式 　［７］ （Ｔａｐｐｉｎｇ　Ｍｏｄｅ，ＴＭ－ＡＦＭ），如图１所示。 用ＣＭ－ＡＦＭ扫描样品时，针尖－样品距离在小于零点几个纳米的斥力区域。由于表面的高低起伏使得针尖－样品距离发生变化，引起它们之间作用力的变化，从而使悬臂的形变量发生改变［３］。用光电转换器记录到同悬臂形变量成比例关系的光强差值，反馈回路则会根据程序预置值不断调整针尖－样品距离以保持两者间作用力不变，就可将探针形变转换得到样品表面形貌图像。若已知样品表面非常平滑时，可让针尖－样品距离始终保持恒定，这时针尖－样品作用力大小直接反映了表面的高低，这种方法称恒高模式［８］。 用ＮＣＭ－ＡＦＭ扫描样品时，针尖在样品表面上 基金项目：西北农林科技大学人才基金项目（编号 作者简介：朱杰（１９８０－　　），男，土家族，在职博士，助教。主要从事生物有机结构分析、环境分子生物物理学研究。　　　　　王国栋（１９５７－），男，教授、博导，教务处长，高教所所长，主要从事大学教学管理、环境生物物理学基础研究。通讯作者：ｅ－ｍａｉｌ：　ｍｅｄｆｂｉ＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｍ，　ｇｄｗａｎｇ２１１＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ ２２ 生命科学仪器　　２００８　第６卷／　３月刊 研究报告 方振动，始终不与样品表面接触。针尖检测的是范德瓦耳斯吸引力和静电力等长程力，对样品没有破坏作用。针尖－样品距离在几到几十纳米的吸引力区域，针尖－样品作用力比接触式小几个数量级，但其力梯度为正且随针尖－样品距离减小而增大。当以共振频率驱动的微悬臂接近样品表面时，由于受到递增的力梯度作用，使得微悬臂的有效的共振频率减小，因此在给定共振频率处，微悬臂的振幅将减小很多。振幅的变化量对应于力梯度量，因此对应于针尖－样品间距。反馈系统通过调整针尖－样品间距使得微悬臂的振幅在扫描时保持不变，就可以得到样品的表面形貌像。由于生物分子的弹性模量较低