抗肿瘤药物筛选方法课件.ppt

法尼基转移酶（Ras）抑制剂筛选 Ras蛋白是调节细胞生长和增殖的信号通路的重要元件, 是控制外来分子信号的分子开关。Ras蛋白以GDP结合和GTP结合两种形式存在。 原理： (pull down assay) 活化形式的GTP-Ras与下游的效应蛋白 Raf（Raf有Ras-binding domain，Raf- RBD）结合。 Raf-RBD-GST融合蛋白固化谷胱甘肽亲 和树脂 （GSH），与含有GTP-Ras的样 品孵育，Raf-RBD与GTP-Ras充分结 合，洗脱后，经免疫印迹检测Ras的表 达量。 GSH resin GST Raf-RBD GTP-Ras Anti-Ras antibody 丝裂原活化蛋白激酶抑制剂筛选 丝裂原活化蛋白激酶是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，将细胞外刺激信号传导到细胞核内，并引起细胞的生物学反应，如增殖、凋亡、分化等。主要有三条信号通路：ERK （Extracellular signal regulated kinase），JNK (c-Jun N-termina