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基因家族分析套路(四)
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今天是基因家族分析类文章最后的一部分,也是一个文章亮点所在的部分,小伙伴们仔细阅读学习吧! 一、转录组及芯片原始数据下载网站 1、 GEO datesets/profile(/gds ).。用法见下图。GEO数据ID命名规则:GPL-gt;GSE-gt;GSM.GPL: platformGSE: multiple series.GSM: multiple samples.GDS ≈ GSE. Thedifference concentrated on the data labeled GDS can be analyzed for one geneonline. It is simple and easily.The data in the sameGPL can be used to compare inexperiment.
下面是在线分析转录组数据的用法:
2、EBI ArrayExpress(http://www.ebi.ac.uk/arrayexpress/) 该数据库下载数据用法如下:
3、PLEXdb(/).该数据库下载数据用法如下,注意用户名和密码!
4、SRA db(/sra/)
5、DRA db(http://trace.ddbj.nig.ac.jp/DRASearch/) 二、数据处理 拿到原始数据,要进行处理,才能进行后续数据分析。1、芯片数据。原始数据格式“.cel”格式。以AffyMicroarray数据处理为例讲述主要的命令如下:gt; library(affy); gt;library(makecdfenv); gt;library……gt; barleyGenome = make.cdf.env(“barleyGenome.cdf)gt;mydata lt;- ReadAffy() ##choose “.cel “ file analyzed.gt;eset lt;- rma(mydata);gt;write.exprs(eset,file=mydata.txt)gt;design lt;- model.matrix(~-1 factor(c(1,1,2,2,3,3))) # Createsappropriate design matrix. gt;colnames(design) lt;-c(group1, group2, group3) # Assigns column names.gt;fit lt;- lmFit(eset, design) # Fits a linear model for each gene based onthe given series of arrays.gt;contrast.matrix lt;- makeContrasts(group2-group1,group3-group2, group3-group1, levels=design) # Creates appropriate contrast matrix toperform all pairwise comparisons.gt;fit2 lt;- contrasts.fit(fit, contrast.matrix)# Computes estimatedcoefficients and standard errors for a given set of contrasts.gt;fit2 lt;- eBayes(fit2) # Computes moderated t-statistics and log-oddsof differential expression by empirical Bayes gt;topTable(fit2, coef=1,adjust=fdr, sort.by=B, number=10) # Generates list of top 10 (number=10)differentially expressed genes sorted by B-values (sort.by=B) for firstcomparison group.gt;write.table(topTable(fit2, coef=1,adjust=fdr, sort.by=B, number=500),file=limma_complete.xls, s=F, sep=\t) # Exports complete limma statistics table forfirst comparison group.gt;results lt;- decideTests(fit2,
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