实验一一叶萩碱的提取与鉴定.pptVIP

实验一：一叶萩碱的提取与鉴定 （l）目的：通过一叶萩碱的提取分离，掌握用离子交换树脂法提取分离生物碱的原理和方法。 （2）要求：分离得到纯一叶萩碱，加以鉴定。 （3）原理：ALK+H+/H2O ALKH+ RSO3-H++ALKH+ RSO3-ALKH++H+ 洗脱：吸碱树脂用NH4+OH-碱化后，反应如下： RSO3-ALKH++NH4+OH- RSO3-NH4++ALK（游离生物碱）+ H2O 一、实验目的、要求、原理： 大戟科植物一叶萩（Securinega suffruticosa ( Pall ) Rehd）也称叶底珠，别名狗杏条等，我国资源十分丰富。其根、叶和嫩枝中均含有多种生物碱，结构已经清楚的有十几种。其中一叶萩碱含量高，已用于临床。该生物碱于1956年首先由苏联学者分离得到。1962 年完全确定了它的化学结构。我国在一叶萩碱的研究方面作出较大贡献，于1962年自国产的一叶萩中用活性炭吸附法提取分离一叶萩碱，并测定了它的化学结构。 二、一叶获简介 一叶碱获和它的衍生物能兴奋中枢 X 神经，增强心肌收缩、升高血压，临床用硝酸一叶获碱治疗面神经麻痹，小儿麻痹骸神经炎和股外侧神经炎感染引起的多发性神经炎，成为神经科疾患的常用药物。 三、实验操作及注意事项 （一）操作 注意事项： [1] 装渗滚筒：渗流筒底部，放一块脱脂棉（先用水湿润）然后将润湿过的药料分次加入，分层填压，顶部盖一张滤纸压上洁净的鹅卵石。 [2] 树脂处理：取新树脂（已用水膨胀过的）置烧杯中，用五倍量的 6~7 % HCI 浸泡过夜，先用离子水洗至 pH3~4 ，改用蒸馏水洗至中性，再用 5 % NaOH （约 2 倍）搅拌洗涤后，水洗至中性，最后用 6~7 % HCl转型，蒸馏水洗至近中性。 [3] 装树脂柱用蒸馏水将已处理好的树脂悬浮起来加到底部垫有脱脂棉的交换柱中，等树脂颗粒下沉后，其上复盖一层棉花或一张滤纸，以免加入液体时，冲破树脂表面，注意在整个操作过程中树脂的上部是要覆盖少量液体，以免进入空气，影响交换效果，将树脂柱表层多余液体由底部活塞放出，待液层降至树脂层表面时，关闭活塞，由柱的上部加入含一叶萩碱的酸水，打开底部活夹。控制流速 1 ．取渗漉液 lml ，加硅钨酸试剂数滴，产生淡黄色沉淀。 2 ．取渗漉液 lml ，加碘碘化钾 T . S 数滴，产生棕褐色沉淀。 3 ．取渗漉液 lml ，加碘化钾秘 T . S 数滴，产生棕红色沉淀。 （二）生物碱的定性试验 （三）鉴定 1．原理：吸附层析 2．TLC： [吸附剂]：Al2O3（中性） [展开剂]： a．CHC13 b．石油醚：CHC13=1 c．CHC13：EtOH=9：1 [样品]：一叶萩碱/CHC13液 [标准品]：一叶萩碱/CHC13液 [显色剂]：碘化秘钾：EtOH= 9：1 3 显微溶点测定 1．为什么要用阳离子树脂交换生物碱？ 2．沙氏提取器的原理及其特点是什么？ 3．用NH3H2O 碱化的目的是什么？ 4．装树脂柱应该注意哪些事项？ （四）思考题