植物原生质体培养与细胞的融合.pptVIP

1. 说明原生质体分离的两种方法 --- 机械法和酶法的特点。 2. 原生质体纯化方法有哪些？原生质体活力的测定方法有哪些？ 3. 简述原生质体3种培养方法及特点。 4. 原生质体融合有哪几种方法？ 5. 杂种细胞及植株筛选方法。 思考题 2种类型的活跃代谢和正在分裂的原生质体混合在液体培养基中一起培养。用于某些物种原生质体或杂种细胞的培养。条件2个物种原生质体间能发生有效的互馈；其产生的愈伤组织形态上能彼此区分。 2）共培养法 3）Cuprak微滴法 高国楠（1977）及Gleba（1978） 设计特别培养皿培养单个原生质体及其再生的细胞。 两室 大的内室：很多小穴，加入原生质体悬浮液（0.25-0.5μl）； 小的外室：注入无菌水，保持培养皿内湿度。 可进行单个原生质体培养。 六、细胞壁的形成 培养2-4天，原生质体失去其特有的球型外观，这是再生新壁的象征。 研究认为， 旋花科植物原生质体只有在外源供应一种易于代谢的碳源（蔗糖）时， 细胞壁才能再生。 培养基中若存在电解质渗透压调节剂时会抑制壁的再生。 壁的形成与细胞分裂有直接关系， 凡是不能再生壁的原生质体就不能进行正常的有丝分裂。 愈伤组织形成后，转入不含渗透压调节剂的培养剂中， 其培养及植株再生与一般组织培养方法相同。 原生质体培养的程序 一、原生质体融合意义原生