课题2 月季的花药培养 * 1、被子植物定义:凡是种子有果皮包被着,胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物 被子植物和裸子植物 2、裸子植物定义:凡是胚珠裸露,外面没有子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物 实例:哈密瓜、杏、桃子 实例:松、紫衫、铁树 * 被子植物 哈密瓜 桃子 * 裸子植物 * 月季:被子植物 * 花丝 花药 一、被子植物的花粉发育 雄蕊 * 被子植物的花粉发育 花丝:支撑着花药的结构 花药:囊状结构,内有很多花粉粒 花粉是花粉母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历:小孢子四分体时期、单核期(居中、靠边)、双核期 雄蕊 * * 花粉粒 小孢子 四分体时期 单核 居中期 单核 靠边期 双核期 小孢子 母细胞 1花粉母细胞 4个小 孢子 减数分裂 有丝分裂 4个营养细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 4个花粉粒 * 二、产生花粉植株的两种途径 ① ② 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 取决于:培养基中激素种类及其浓度配比 * 二倍体 单倍体 * 愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞(细胞排列疏松、无规则)。 * 体细胞胚:在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚。 花粉胚:最后发育成单倍体植株 胚状体 * 植物类型:不同种植物诱导成功率不同 生理状态:花期早期的花药反应能力较好 花粉发育时期:单核靠边期 三、影响花药培养的因素 其他因素 * 完全未开放的月季花蕾(选) 略微开放的月季花蕾 * 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难? 花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。 * 四、实验操作 (一)材料的选取 ②焙花青-铬矾法 蓝黑色 ①最常用:醋酸洋红法 红色 1、方法 * ①醋酸洋红的配置 2、醋酸洋红法 ②染色操作 3、焙花青—铬钒法 ①卡诺氏固定液的配制方法 ②焙花青—铬钒溶液的配制方法 ③染色操作 * (二)材料的消毒 1、酒精处理 ①酒精:70%的酒精浸泡,30秒 ②无菌水清洗 ③无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 2、消毒液处理 ① 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟(也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液) ② 无菌水冲洗3~5次 * (三)接种和培养 ②要彻底去除花丝 1、剥取花药(无菌条件) ①勿损伤花药 注意: 每瓶接种花药7-10个。 2、接种 * ①培养条件:温度:25℃左右,不需要光照 3、培养 ②培养 ③注意:必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开 主要原因:营养核和生殖核融合 4、鉴定和筛选 * 选材是否恰当 选材是否成功是花药培养成功的关键。应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。 五:课题成果评价 * 无菌技术是否过关 如果出现了污染现象,说明某些操作步骤,如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。 * 接种是否成功 如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体,花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基,以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。 * 植物组织培养技术与花药培养技术的异同点: 项目 相同点 不同点 植物组织培养技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。 外植体为体细胞,染色体数无需加倍。 花药培养技术 取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。 * * ****** ,,,,,
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