实验三蚕豆染色体组型分析.pptxVIP

一、实验目的;二、实验原理;染色体分类一般采用Levan提出的标准，按臂比（arm ratio = 长臂长度/短臂长度）将染色体分为四类：;三、实验材料 蚕豆或洋葱根尖； 细胞中期分裂相显微摄影放大照片 四、实验器具和药品 1. 器材 显微镜，载玻片，盖玻片，恒温水浴锅，温度计，烧杯，指管，镊子，解剖针，染色板，纱布，吸水纸 2. 药品 Schiff试剂，1M HCl，冰乙酸，95%乙醇，70%乙醇，0.1%秋水仙素。;五、实验步骤;1%秋水仙素溶液（量以浸没其根尖为宜） 用刀片或剪刀将上述处理的根尖剪下1cm左右，卡诺固定液室温固定2－24h，固定液量为根尖材料体积的15倍以上。 用95%乙醇冲洗根尖后置于70%乙醇中0- 4℃冰箱保存1—2年。;植物多采用压片方法制备 从固定液中选取6—8个根尖放在盛有1M HCl的试管中，在60℃水浴中水解8min 用刀片或解剖针切取根尖1mm于载玻片上,加入改良的苯酚品红，染色1-2min，根尖应呈深紫红色 用刀片分割成4—5小块，用针尖拨碎分散开，加上盖玻片，复以吸水纸，用拇指或橡皮头玻璃棒用力均匀地敲打盖片，使根尖细胞成一单层细胞（材料呈云雾状），进行镜检。 ;3. 染色体二倍数（2n）的确定;4. 染色体观察;5.核型分析;染色体;;;6. 选取其中形态最好，最有代表性的一个分裂相照片，依次剪下各单个的染色体，按表型特征将全部染色体配同源对（或同源组）。配对的根据是随体的有无及大小，臂比是否相等，染色体长度是否相等。 7. 将染色体全部的同源对（或同源组）按以下规则依次整齐排列： ①全部着丝点对齐在同一水平线上， ?②短臂朝上长臂在下， ③按大小降序从左到右依次排队（等长的染色体，短臂长者排在前头）， ④具随体染色体、性染色体排放在最后（蚕豆染色体组型例外）；若有二对以上具随体染色体，则大随体染色体在前，小随体染色体在后。 ;8. 将排好的染色体对（组）按先后顺序粘贴在绘图纸上，编上序号；然后翻拍定型，使其成为核型照片； 9. 画出标准化模式图：用坐标纸或绘图纸绘成染色体模式图。 ;六．思考题和作业 什么是染色体组型？主要包括那些内容？ 你???为研究某物种染色体组型分析的关键是什么？ 提交良好的细胞分裂相照片3-5张 蚕豆染色体组型分析结果----数据统计表，核型图, 核型公式 K(2n)=( )m + ( )sm + ( ) st + ( ) t + ( )( ) sat