高中生物选修三-动物细胞培养.ppt

动物细胞培养 *  植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 那么动物细胞常用的技术手段 呢？ 植物组织培养, 植物体细胞杂交 问题探讨 * 人耳鼠 “人耳鼠”再出风头 2001年，一只特别的活老鼠在北京引起轰动——这是有着一对红眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的小白鼠。值得一提的是，这只小白鼠的背上，竟长着一只几乎与身子一般大小的“人耳”。这只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民医院副院长、整复外科主任曹谊林教授利用组织工程技术复制出来的。 在京展出的数天，尽管门票高达20元，但还是有将近20万人，心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠”的风采。 人耳鼠的出现，透露了怎样的信息？ 随着人类生命奥秘的揭晓，有朝一日人体就会像一辆汽车一样，哪个零件坏了，可再买一个新的换上。 * 动物细胞工程： 动物细胞培养、动物细胞核移植、 动物细胞融合、生产单克隆抗体等 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 * 就是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单细胞，然后,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 1、动物细胞培养的概念： * 2. 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶 洗涤、稀释、分离 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，增殖能力越强，越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢，核型可能变化 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 贴壁生长 接触抑制 10代以内，保持正常二倍体核型 传代培养 * 3、动物细胞培养过程中几个重要的概念 （1）. 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上（单层）。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 * （2）接触抑制 细胞从接种到长满底物表面后，由于细胞繁殖数量增多相互接触后，不再增加。 * （3）原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 （4）传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 * 细胞株： 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有发生变化。 细胞系： 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 （老教材内容，仅供参考） * 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 知识点小结：各个新名词之间的联系 多数组织细胞固定在表面生长和分裂。 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 遗传物质改变 * （1）、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） （2）、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清、微量元素等） （3）、温度和pH 温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 （4）、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、动物细胞培养条件 保证细胞顺利的生长增殖 离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？ * * 培养器皿 动物细胞培养瓶内表面为什么 要光滑、无毒？ * 5、动物细胞培养技术的应用 （1）生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （3）用于检测有毒物质 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 （5）作为基因工程的受体细胞 * 获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 促生长因子 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 6、植物细胞和动物细胞培养的比较 * 本节内容小结 1、动物细胞培养过程涉及的概念 细胞贴壁、细胞的接触抑制、原代培养、传代培养、细胞株、细胞系 3、植物细胞和动物细胞培养的比较 4、动物细