DNA组技术应用基本工具.pptVIP

1、要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？ 要切两个切口，产生四个黏性(平)末端。 2、如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性(平)末端 思考? 如果将两种切割片段混合在一起可能有什么现象发生？ 1.类型： （二）DNA连接酶----“分子缝合针” 阅读课本5—6页，思考下列问题 ⑴ E·coli DNA连接酶 ⑵ T4 DNA连接酶 2.作用： 小结： 类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 功能 大肠杆菌 T4噬菌体 恢复 磷酸 二酯键 只能连接黏性末端 能连接黏性末端和平末端(效率较低) 相同点 差别 E·coli DNA连接酶　　　　　　　　 本质：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 T4 DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端 还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 T4DNA连接酶 本质：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 DNA聚合酶 DNA连接酶 区别 相同点 寻根问底 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 1)只能将单个核苷酸连接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯键 形成磷酸二酯键 1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？ 导入过程需要运输工具——运载