淋病奈瑟菌核酸检测试剂盒国家参考品的制备_王春娥.docVIP

基金项目:国家科技基础条件平台国家微生物资源平台奖补经费资助项目(NIMＲ2015-2 作者简介:王春娥(1980－,女,助理研究员,主要从事医学微生物菌种资源的收集、保藏及相关科研。 通讯作者:叶强,主任技师,E-mail:qiangyee@nifdc．org．cn ·论著· 淋病奈瑟菌核酸检测试剂盒国家参考品的制备 王春娥,卢旭,刘茹凤,石继春,李红,陈琼,唐静,陈翠萍,叶强 中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京100050 摘要:目的制备淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,NG核酸检测试剂盒国家参考品。方法分别将10株NG和 10株非NG参考菌株在各自适宜的培养基和温度下培养,收获新鲜无污染培养物,用比浊法和显微计数法将不同 的培养物制备成10份NG菌悬液阳性参考品、5份精密性参考品和10份非NG菌悬液阴性参考品以及最低检出限 参考品,然后利用5种不同来源的NG核酸检测试剂盒验证各种参考品,并考察参考品在不同处理条件下的稳定性。结果每株菌在各自适宜的培养基和温度下培养后,均生长良好,无杂菌污染。经5种试剂盒验证检测,10份 阳性参考品的检测结果均为阳性,10份阴性参考品的检测结果均为阴性,精密性参考品检测结果为Ct值的CV均 小于5．0%;5种试剂盒的最低检出限均能达到1000/mL,其中试剂盒B和E的最低检出限达10