CN103314852A利用根高效繁殖石斛兰的方法及其培养基.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN103314852A* *CN103314852A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 103314852 A (10)申请公布号 CN 103314852 A (43)申请公布日 2013.09.25 (21)申请号 201310270237.7 (22)申请日 2013.06.28 (71)申请人 上海市农业科学院 地址 201106 上海市闵行区北翟路2901 号 (72)发明人 张建军 周音 陈敏敏 谢纪红 (74)专利代理机构 上海汉声知识产权代理有限 公司 31236 代理人 牛山 陈少凌 (51)Int.Cl. A01H 4/00 (2006.01) 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 权利要求书1 页 说明书5 页 附图3 页 (54)发明名称 利用根高效繁殖石斛兰的方法及其培养基 (57)摘要 本发明公开了一种利用根高效繁殖石斛兰 的方法及其培养基。本发明的方法包括以下步 骤：选取石斛兰的根段，接种，诱导得到胚性愈伤 组织，胚性愈伤组织可进一步通过继代大量增殖； 将胚性愈伤组织转移到原球茎诱导培养基中，诱 导、增殖得到原球茎及芽苗；将原球茎及芽苗转 接到成苗培养基上，培养得到石斛兰生根植株。本 发明以MS 为基本培养基，用于胚性愈伤组织诱导 或继代的培养基需添加6-BA 和PIC，用于原球茎 诱导的培养基需添加CPPU 和NAA。本发明所提供 的利用石斛兰根培养再生植株的方法，繁殖系数 高，成苗率高，成本低，可一步完成原球茎的成苗、 壮苗与生根过程，植株健壮、根系发达。 A A 2 2 5 5 8 8 4 4 1 1 3 3 3 3 0 0 1 1 N N C C CN 103314852 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1. 一种利用根高效繁殖石斛兰的方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤一，选取石斛兰的根段，接种于胚性愈伤组织诱导培养基中，培养，诱导得胚性愈 伤组织； 步骤二，将所述胚性愈伤组织转移到愈伤组织继代培养基中，培养，使胚性愈伤组织增 殖； 步骤三，将步骤一所述的胚性愈伤组织或步骤二所述的增殖后的胚性愈伤组织转移到 原球茎诱导培养基中，培养，得到原球茎，所述原球茎能够在该原球茎诱导培养基上增殖并 发育成芽苗； 步骤四，将所述原球茎或者芽苗转接到成苗培养基上，培养，得生根的石斛兰再生植 株。 2. 如权利要求1 所述的利用根高效繁殖石斛兰的方法，其特征在于，步骤一中，所述胚 性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA0.6mg/L+PIC3mg/L+ 蔗糖30000mg/L+ 琼脂粉5000mg/L。 3. 如权利要求1 所述的利用根高效繁殖石斛兰的方法，其特征在于，步骤二中，所述愈 伤组织继代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+PIC2mg/L+ 蔗糖30000mg/L+ 琼脂粉5000mg/L。 4. 如权利要求1 所述的利用根高效繁殖石斛兰的方法，其特征在于，步骤一和步骤二 中，所述培养为暗培养，培养的温度为25±2℃。 5. 如权利要求1 所述的利用根高效繁殖石斛兰的方法，其特征在于，步骤三中，所述原 球茎诱导培养基为MS+CPPU0.1mg/L+NA