CN102600467Aβ-葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102600467A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102600467 A (43)申请公布日 2012.07.25 (21)申请号 201210088329.9 (22)申请日 2012.03.29 (71)申请人 戚春建 地址 213003 江苏省常州市天宁区兴隆巷 29 号 (72)发明人 戚春建 宁永玲 王仕忠 钱科卿 (74)专利代理机构 常州市江海阳光知识产权代 理有限公司 32214 代理人 孙晓晖 (51)Int.Cl. A61K 39/385 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01) C12N 5/0784 (2010.01) A61P 35/00 (2006.01) 权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 4 页 权利要求书1 页 说明书3 页 附图4 页 (54)发明名称 β- 葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中 的应用 (57)摘要 本发明公开了一种β- 葡聚糖在制备人树突 状细胞肿瘤疫苗中的应用。该应用具有以下步骤： ①用含有GM-CSF 和IL-4 的培养基培养人外周血 单核细胞，获得未成熟人树突状细胞；②用β- 葡 聚糖诱导肿瘤抗原负载到步骤①获得的未成熟人 树突状细胞内，获得人树突细胞肿瘤疫苗。所述的 β- 葡聚糖的浓度为80 μg/mL ～120μg/mL。本 发明采用β- 葡聚糖诱导肿瘤抗原负载到未成熟 的人树突状细胞内，从而得到人树突状细胞肿瘤 疫苗，该疫苗能够提高人树突状细胞的免疫效能， 促进T 细胞的增殖能力，特别能够体外刺激T 细胞 具有特异性肿瘤杀伤能力，从而用于治疗各种恶 性实体瘤。 A 7 6 4 0 0 6 2 0 1 N C CN 102600467 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1.β- 葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中的应用。 2. 根据权利要求1 所述的β- 葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中的应用，其特征 在于具有以下步骤： ①用含有GM-CSF 和IL-4 的培养基培养人外周血单核细胞，获得未成熟人树突状细 胞； ②用β- 葡聚糖诱导肿瘤抗原负载到步骤①获得的未成熟人树突状细胞内，获得人树 突细胞肿瘤疫苗。 3. 根据权利要求2 所述的β- 葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中的应用，其特征 在于：步骤②中所述的β- 葡聚糖的浓度为80 μg/mL ～120μg/mL。 4. 根据权利要求2 或3 所述的β- 葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中的应用，其 特征在于：步骤①中所述的含有GM-CSF 和IL-4 的培养基中，GM-CSF 的浓度为80ng/mL ～ 120 ng/mL，IL-4 的浓度为30ng/mL ～70ng/mL。 5. 根据权利要求2 或3 所述的β- 葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中的应用，其 + 特征在于：步骤①中所述的人外周血单核细胞为CD14 外周血单核细胞，它是由血细胞分离 机从人外周血中先分离获得外周血单个核细胞，再通过磁珠分选系统从外周血单个核细胞 中分选获得。 6. 根据权利要求2 或3 所述的β- 葡聚糖在制备人树突状细胞肿瘤疫苗中的应用，其 特征在于：步骤①中所述的未成熟人树突状细胞为培养 100h ～140h 获得的。 7. 根据权利要求2 或3 所述的β- 葡聚糖在制备人