《第五章基因工程的酶学基础_》-公开课件.pptVIP

5. 几种常用限制酶识别位点 大多数酶可用65 oC温育5分钟失活。 或用乙醇沉淀DNA。 4. 限制酶酶切反应的终止 从细菌DNA环化现象推测，必定存在一种能把两条DNA双链连接到一起的酶。 第二节 DNA 连接酶 一、DNA连接酶（ligase)的发现 1967年，世界上几个实验室几乎同时发现了一种能够催化两条DNA的末端之间形成磷酸二酯键的酶，即DNA连接酶。 修复双链DNA上缺口处的磷酸二酯键 DNA连接酶 5‘ … G-C-T-C-T-G-C-A G-G-A-G … 3’ 3‘ … C-G-A-G A-C-G-T-C-C-T-C … 5’ OH P OH P 5‘ … G-C-T-C-T-G-C-A-G-G-A-G … 3’ 3‘ … C-G-A-G-A-C-G-T-C-C-T-C … 5’ nick nick 二、DNA连接酶的基本性质与特点 DNA连接酶的基本性质 DNA连接酶 DNA连接酶的基本性质 修复与RNA链结合的DNA链上缺口处的磷酸二酯键 T4-DNA连接酶 5‘ … G-C-U-C-U-G-C-C-G-G-A-G … 3’ 3‘ … C-G-A-G A-C-G-G-C-C-T-C … 5’ OH P nick 5‘ … G-C-U-C-U-G-C-C-G-G-A-G … 3’ 3‘ … C-G-A-G-A-C-G-G-C-C-T-C …