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- 2020-01-08 发布于广西
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(四)血红蛋白 在红细胞的组成中,约90%是血红蛋白。它由四个肽链组成,包括两个α—肽链和两个β—肽链。每条肽链环绕一个亚铁血红素基团,可携带一分子氧或一分子二氧化碳。血红蛋白因含血红素而呈现红色。 二、实验操作 蛋白质的提取和分离一般分为四步: (1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。 (2)粗分离:透析除去分子较小的杂质。 (3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。 (4)纯度鉴定:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。 二 实验操作 蛋白质的提取和分离一般分为四步: 1.样品处理 血液 血浆 水分 固体物质 血浆蛋白 无机盐 磷脂 葡萄糖等 血细胞 白细胞 血小板 红细胞 (最多) 血红蛋白 ( ) 两个a-肽链 两个β一肽链 样品处理—粗分离—纯化—纯度鉴定 共四条肽链 90% (一)样品处理 1、红细胞的洗涤: 目的是去除杂蛋白。要加入柠檬酸钠防止血液凝固;离心将血液分层,用胶头吸管吸出黄色血浆;用生理盐水洗涤。 2、血红蛋白的释放: 在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放 3、分离血红蛋白溶液: 离心分层;滤纸过滤去除脂溶性沉淀层;分液漏斗分出红色透明液体。 4、透析: 装入透析袋并置于磷酸缓冲液中(PH为7.0)透析。 红细胞的洗涤 分离血红蛋白溶液 有机溶剂 无色透明的甲苯层 脂类物质
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