热原试验 演示文稿.pptVIP

热原检查法 家兔热原试验 一 试验目的 将一定剂量的供试液，静脉注入家兔体内，在规定的时间内观察家兔体温升高的情况，以判定供试品是否具有潜在的致热作用。 依据方法： GB/T14233.2-2005医用输液、输血、注射器具检验方法、中国药典2010 二 所需仪器设备 超净工作台、电热干燥箱、水浴锅、肛门体温计 所用试剂： 医用生理盐水 三 试验家兔的选择 家兔应健康，雌雄不限，体重1.7kg以上，雌兔应无孕。预测体温前7日即应用同一饲料饲养，在此期间内，体重应不减轻，精神、食欲、排泄等不得有异常现象。 三 试验家兔的选择 ㈠未曾用于热原检查的家兔；或供试品判定为符合规定，但组内升温达0.6℃的家兔；或3周内未使用的家兔，均应在检查供试品前3~7日内预测体温，进行挑选。挑选试验的条件与检查供试品时相同，仅不注射药液，每隔30分钟测量体温1次，共测8次，8次体温均在38.0~39.6℃的范围内，且最高与最低相差不超过0.4℃的家兔，方可供热原检查用。 三 试验家兔的选择 ㈡ 用于热原试验后的家兔，如供试品判定为符合规定，至少应休息48小时方可再本试验用，其中体温升高0.6 ℃ 以上的家兔，至少休息两周后以上。如供试品判定为不符合规定，则组内全部家兔不再使用。每一家兔的使用次数，用于一般药品的检查，不应超过10次。 四 试验前家兔的准备 ㈠ 在做热原检查前1~2日，供试用家兔 应尽可能处于同一温度的环境中，实验室和饲养室的温度相差不得大于3℃，实验室的温度应控制在17~25℃，在试验全部过程中，应注意室温的温度变化不得大于3℃，防止动物骚动并避免噪声干扰。 四 试验前家兔的准备 ㈡ 家兔在试验前至少1小时开始停止给食并置于适宜的装置中，直到试验完毕。应使用精密度为±0.1℃的测温装置测量家兔体温。测温探头或肛温计插入肛门的深度和时间各兔应相同，深度一般约6cm，时间不少于1.5分钟，每隔30分钟测量体温1次，一般测量2次，两次体温之差不得超过0.2℃. 四 试验前家兔的准备 ㈢ 以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。当日使用的家兔，正常体温应在38.0~39.6℃的范围内，且各兔间的正常体温之差不得超过1℃. 五 试验前器械的准备 注射器（带针头）及一切与供试品溶液接触的器皿应是无菌、无热原，如试管等应采用干热灭菌法置烘箱中用250℃加热30分钟，也可用其他适宜的方法除去热原。 六 供试液的制备 依据标准：GB/T16886.12 按0.2g:1ml（样品:生理盐水）的比例进行萃取，条件为37±1℃，时间为1小时。萃取液应在2小时内使用完毕。 七 试验方法 取适用的家兔3只，测定其正常体温后15分钟以内，自耳静脉缓缓注入规定剂量(10ml/kg)并温热至约38℃的供试品溶液，然后每隔30分钟按前法测量其体温1次，共测6次，以6次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度。 七 试验方法 如3只家兔中有1只体温升高了0.6℃或0.6℃以上，或3只家兔体温升高均低于0.6℃，但体温升高的总和达1.3℃或1.3℃以上，应另取5只家兔复试，检查方法同上。 八 结果判断 ㈠在初试的3只家兔中，体温升高均低于0.6℃，并且3只家兔体温升高总和低于1.3℃；或在复试的5只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔不超过1只，并且初试、复试合并8只家兔的体温升高总和为3.5℃或3.5℃以下，均判为供试品的热原检查符合规定。 八 结果判断 ㈡在初试的3只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔超过1只；或在复试的5只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔超过1只；或在初试、复试合并8只家兔的体温升高总和超过3.5℃，均判为供试品的热原检查不符合规定。 当家兔升温为负值时，均以0℃计。 表格 * *