bcl2基因在缺血再灌注损伤中的调控及中药干预的研究.pdfVIP

Bcl-2基因在缺血-再灌注损伤中的调控及中药干预的研究进展 魏 瑜，陈礼明(1.安徽医科大学附属省立医院，合肥市 230001；2.安徽医科 大学药学院，合肥市230001) 中图分类号 R285；R969 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2008)09-0707-04 细胞凋亡是一种由基因调控的细胞内分子水平的编程性活动，因其启动和进程受一定程 [1] 序的控制，故也称为程序性死亡。1972年，KerrJF等 首次提出这一概念，并指出它独有 的形态特征:染色质密集、边缘化，核高度凝集，染色体上核小体间连接区被酶切造成 DNA 链断裂，形成核碎片，出现凋亡小体。在凋亡的过程中细胞膜始终保持完整，细胞质依然被 局限于胞膜内，不释放到组织。因此在凋亡的过程中无炎症反应发生，这对于维持组织自身 稳态十分重要。 在众多的凋亡相关基因中，B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)蛋白家族目前最受关注。 它最早是从滤泡性淋巴瘤中分离鉴定得到的，在细胞内定位于核膜、内质网、线粒体膜，通 过调控线粒体细胞结构和功能的稳定性而发挥凋亡主开关的作用。近年来大量研究证实， 由Bcl-2蛋白家族参与调控的细胞凋亡在缺血-再灌注损伤(Ischemia-reperfusioninjury， I/R)性疾病中发挥了重要作用，中药及其提取物的干预研究也日益受到关注。 1 Bcl-2蛋白家族的结构与功能 Bcl-2是一个多基因家族，主要由两大结构域构成，即位于羧基端的跨膜结构域 (Transmembraneregion，TM)和数量不等(1~4个)的Bcl-2同源结构域(Bcl-2homology， BH)。目前，已经在哺乳动物、线虫和细菌中发现并鉴定出了Bcl-2家族的20余种蛋白质。 [24] ~ 根据它们在细胞凋亡中发挥作用的不同可分为2类:即抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白 (详见表 1)。根据其含有BH的种类和数量不同又可分为3个亚家族:即结构中大部分都共有BH-1~4 区域的抗凋亡蛋白(亚家族 1)；结构中都共有 BH-1~3区域的促凋亡蛋白(亚家族 2)；结构 中仅共有BH-3区域的促凋亡蛋白(亚家族3)。在4个结构域中，BH-3被认为是死亡结构域， 对促进凋亡进程起着至关重要的作用。而BH-4是抗凋亡蛋白所特有的结构域，促凋亡蛋白 中除Bcl-xS基因外，其它成员都缺乏该结构域。虽然它并不直接参与二聚体的形成，但它 的缺失可导致抗凋亡蛋白功能的丧失。 正常生理状态下，Bcl-2基因家族的大部分抗凋亡蛋白一般作为细胞器膜的整合膜蛋白 被隔离起来，而促凋亡蛋白则以非活性的形式定位分布于胞液中或细胞质骨架上。一旦细胞 受到死亡信号刺激，促凋亡蛋白便在某些蛋白酶的作用下发生构象变化，从胞液中易位到细 胞器的膜结构上，尤其是线粒体外膜，并与膜上的抗凋亡蛋白发生相互作用，形成同源或异 源二聚体，调控蛋白酶和核酸酶活性，双向调节细胞凋亡。大量实验显示，抗凋亡蛋白与促 凋亡蛋白的比例在一定程度上决定了细胞是否发生凋亡，Bax/Bcl-2比值高的细胞较 Bax/ [5] Bcl-2比值低的细胞容易发生凋亡。MoreauC等 研究指出，只具有BH-3结构域的多肽(如 Bid、Bad)既能诱导形成Bax-Bax寡聚体，还能与抗凋亡蛋白Bcl-2等形成异源二聚体，抑 制抗凋亡蛋白的生物学功能。有人研究人食道癌时发现，降低Bcl-2蛋白的同时又增加Bax 蛋白表达的联合作用，与单独调节一个基因的作用相比较更能直接导致细胞大量死亡，说明 2个基因协同作用比单独改变1个基因更有效。 2 Bcl-2蛋白家族作用的传导通路和分子机制 2.1 死亡传导通路 目前研究认为，哺乳动物的凋亡由2条通路构成，即死亡受体通路和线粒体通路。虽然 两者最终都是通过半胱氨酸蛋白酶(Caspases)的激活而诱导细胞发生凋亡，但Bcl-2蛋白家 族被证实只在后者发挥重要作用。线粒体不但是细胞的发电站，而且还是细胞的军工厂，其 [6] 中最